HPLC法测定青钱柳韧皮部内源激素的方法优化开题报告

 2021-08-08 21:07:30

1. 研究目的与意义

青钱柳[Cylocarya paliurus(Batal.)Iljinskaja]又名摇钱树、山沟树(浙江)、麻柳(湖北)、青钱李等,系胡桃科(Juglandaceae)青钱柳属植物,它广泛分布于我国的亚热带地区的江西、浙江、江苏、安徽、福建、台湾、湖北、四川、贵州、湖南等省[1]。据《中国中药志要》记载,其树皮、树叶具有清热解毒,止痛功能,可用于治疗顽癣,长期以来民间用其叶片做茶[1]。20世纪80年代以来,一些以青钱柳叶为主要原料的初级保健品上市,经国内一些大专院校科研机构及医院初步的动物及临床实验,表明这些产品确实具有多种对人体有利的生理和药理功能。青钱柳材质密度比我国传统的枪托用材胡桃楸还大,木材纹理直,结构略细,重量和硬度适中,干燥快,切削容易且切面光滑,适宜做家具、农具、胶合板及建筑材料等[2]。另外,青钱柳树姿优美,果似铜钱,可以作为优良观赏绿化树种及造林树种[1]

目前可利用的青钱柳资源匮乏,国内外尚无大量人工繁殖和栽培青钱柳的成功经验,制约了青钱柳的开发利用和产业化进程[3]。洑香香等[4-5]对青钱柳天然林分的大量调查发现,天然林分中结实率高,但种子的饱满度较低;对青钱柳开花特性的物候学观察和解剖学初步研究,推测雌雄异型异熟的开花特性是造成这种现象的主要原因。雌雄异型异熟(heterodichogamy)是雌雄异熟的一种特殊形式,指的是在雌雄同株异花植物群体中包括两种交配类型植株,即雌花先熟个体(雌先型protogyny:在花粉散落前柱头已成熟处于可授期)和雄花先熟个体(雄先型 protandry:花粉在柱头成熟前已散落);在群体水平上,当一种交配类型(如雄先型)散粉时,另一交配类型的柱头正处于可授期(雌先型),然后它们交换角色[6-7]

2. 国内外研究现状分析

2.1花芽分化基本进程

花芽分化是植物生长发育中一个十分重要的阶段。通常情况下,植物生长到一定阶段后便由叶芽生理和组织状态转变为花芽生理和组织状态,然后发育成花器官原基雏形,此过程称之为花芽分化[8]。通常情况下植物的花芽分化过程大致可分为5个阶段, 即:分化初期、萼片分化期、花瓣分化期、雄蕊分化期和雌蕊分化期[9]。不同的研究者对不同植物的花芽分化时期的划分可能存在差别, 但就整体而言, 植物的花芽分化时期的形态变化是大致相同。分化初期的特点为生长点先变得圆滑肥大,向上隆起,呈半球形,以后生长点继续伸长增大,生长点范围内的原分生组织细胞下面是初生髓部, 细胞大而圆, 排列疏松。花蕾分化期的特点为在隆起的半球形生长点上分化产生出1~3个突起,即为花蕾原基。萼片分化期的特点为伸长后的生长点顶端变得宽而平坦, 继而在周围产生突起(切片上为两边突起),此突起即为萼片原基。花瓣分化期的特点为随着萼片原基的分化和不断发育,在其内侧基部产生突起,即为花瓣原基。雄蕊分化期的特点是花瓣原基内侧基部相继出现两轮突起,即为雄蕊原基。雌蕊分化期的特点是雄蕊原基的内侧基部,花蕾底部中央向上出现突起,即为雌蕊原基[10]

2.2.影响植物花芽分化因素

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3. 研究的基本内容与计划

3.1研究内容

本研究以青钱柳为试验材料,旨在通过对青钱柳不同交配类型(雌先型和雄先型)花芽分化和花发育各个阶段的雌雄花芽以及叶片中的四大类内源激素:脱落酸、生长素、细胞分裂素、赤霉素的分析测定,探讨青钱柳雌雄花芽异熟性生理分化过程中内源激素的变化规律,以此确定青钱柳花芽分化的关键期,揭示其性别决定机理和花发育进程,从理论上深入阐述雌雄异型异熟植物的开花机制。同时比较雌先型、雄先型花芽分化和发育过程中的内源激素差异,揭示雌先型雌雄花芽和雄先型雌雄花芽分化和发育的不同步性和异熟性。在生产上通过合理配置人工林群体不同交配类型的比例,结合人工授粉手段,可为提高种子产量和质量提供有效的理论依据和技术支持。

3.2研究方案

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4. 研究创新点

青钱柳内源激素提取方法的优化:

根据王世平等22的方法可知:1.激素提取剂最好用甲醇,虽然其毒性高于乙醇,但渗透力强,从表观看提取更充分,提取尽 量在低温下进行,甲醇要用冷镇过的,匀浆机匀浆时甲醇要用冷冻的,以免升温。

2.提取液用细菌漏斗过滤比使用滤纸要好,滤液最好能离心一次,可减少溶剂萃取时的杂质干扰。

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