鹅掌楸磷酸化蛋白质鉴定开题报告

1. 研究目的与意义

杂交鹅掌楸是我国著名林木遗传育种专家叶培忠教授利用分布在我国的鹅掌楸和分布在北美的北美鹅掌楸通过人工杂交育成的种间杂种，具有重要的经济价值和社会价值。蛋白质磷酸化是蛋白质翻译后修饰重要之一，其参与了细胞的多种生命活动，如细胞周期，细胞凋亡，代谢，增殖和发育。此外，据预测生物体内在每一时刻所有蛋白质约有三分之一会发生磷酸化。因此蛋白质磷酸化研究对植物发育起着非常重要的作用。

2. 国内外研究现状分析

一、蛋白质组学研究及发展趋势

1.蛋白质组发展

蛋白质组( proteome) 一词是由澳大利亚的 marcwilkins 首先提出，并于 1995 年在 electrophoresis 杂志上首次发表了关于蛋白质组学的概念的文章[1]。蛋白质组是由蛋白质( protein) 与基因组( genome)两个词组合而成，指一个细胞或组织基因组的全部蛋白质。它对应于基因组( genome) 的所有蛋白质构成一个整体，即生物个体、器官、组织和细胞等在特定环境或特定时期的全部蛋白质的表达图谱。这一概念的提出很快得到国际普遍认可，并且随后提出了蛋白质组学( proteomics) 的概念。蛋白质组学是现代科学技术发展的产物，在受到技术发展驱动的同时也受到技术发展的制约［2］。早在 19 世纪70 年代，ofarrell 等［3］就用 np-40 和 9 mol / l 尿素对大肠杆菌细胞抽提物进行双向凝胶电泳分析。此后，双向凝胶电泳技术又有许多改进，如固相化 ph 梯度技术的引进使得双向凝胶电泳技术的重复性和控制加样量等方面得到巨大的改 善［4－6］; 差异凝胶电泳( dige) 利用多重荧光分析的方法，第一次引入了内标的概念。dige 技术中每个蛋白点都有自己的内标，极大地提高了结果的准确性、可靠性和重复性［7］; tap 技术综合了经典的亲和纯化和免疫共沉淀这两种技术的优点，为研究高等真核生物的蛋白质相互作用网络和蛋白质组学提供了新方法［8，9］。

3. 研究的基本内容与计划

1.依据已建立的杂交鹅掌楸胚性与非胚性pro-q图谱进行差异分析

2.跑电泳做制备胶

3.差异蛋白点酶解

4. 研究创新点

鉴定了与胚性发育相关的磷酸化蛋白质