Brenneria salicis对柳树的致病性研究开题报告

1. 研究目的与意义

柳树是我国最常见的乡土树种之一，在我国东北、华北、西北、及长江流域各省区广泛栽培。近年来，西宁、内蒙古等省区发现柳树有大面积整株死亡现象。前期研究中，我们从柳树枯萎病病枝上分离纯化出多株细菌，根据形态和分子特性进行鉴定，与以往报道的柳树枯萎病病原菌（Brenneria salicis）一致，然而，由于该细菌同时也是柳树体内的内生菌，所以，给其病原性鉴定带来了一定困难。为了进一步证实其致病性，本研究拟建立柳树无菌组培体系，在无菌条件下以柳树组培植株进行接种试验，以排除环境及柳树体内微生物对试验结果的影响，正确评估该细菌在柳树枯萎病中的作用。

2. 国内外研究现状分析

国外研究概况：早在1924年荷兰科学家Day在英国切尔默河沿岸，首次报道了该病害，通过实验和检测，他发现引起该病害的是一种革兰氏阳性，兼性厌氧型杆菌，并将其命名为柳树杆菌（Bacterium salicisn.sp.）；1931年国外学者Linderjer在荷兰的柳树上，发现了感病症状和Day所报道的具有相似特征的病害，但她分离得到的病菌是革兰氏阴性，因而，她将获得的病原物另命名为柳树假单胞茵（Pseudomonas saliciperda）；1937年Dowson对该病害进行深入研究，最终把该病原物命名为柳欧文氏茵（Erwinia salicis）；Gremmen和DeKam对Dowson的研究进行了验证，同时他们认为引起英国和荷兰的柳树枯萎病的病原物是同一种细菌，即柳欧文氏茵（Erwinia salicis）。目前在英国、荷兰、比利时、澳大利亚、美国、日本都有关于柳树性枯萎病的报道，但是都没有好的防治方法。

国内研究概况：査阅我国柳树已报道的病害，发现这些已报道病害与鄂尔多斯地区旱柳枯萎症状相同或相似的很少，仅有一篇关于西宁地区柳树枯萎的报道，并且该病害症状与鄂尔多斯地区发病柳树的病症非常相似。2001年金九辰等人对西宁地区柳树枯萎进行了深入研究，发现该病的病原为柳欧文氏茵（Erwinia salicis）；2016年晁开瑞等人进行了柳树枯萎病病原菌及其致病毒素和潜在风险性的研究，基本了解了该病害的发生原因，确定了造成鄂尔多斯地区柳树枯萎的病原菌，为成团肠杆菌（Enterobacter agglomerans）。

3. 研究的基本内容与计划

（1）2018.1.10―2018.1.14：阅读文献，搜集资料；

（2）2018.1.11―2018.1.13：预备实验的建立，进行柳树组织培养，得到柳树无菌组培体系，撰写开题报告和综述；

（3）2018.2.25―2018.4.20：若之前培育的染菌了，则继续柳树组培；若未染则继续实验；

4. 研究创新点

柳树枯萎病病原菌（Brenneria salicis）是内生菌，对于其致病机理：是由内生菌引起的，还是由环境中的病原菌引起的，目前尚未能正确评估。本课题通过开展工作，希望能正确评估该细菌在柳树枯萎病中的作用。