樟疫霉部分效应蛋白的初步功能研究开题报告

1. 研究目的与意义

杜鹃花（rhododendron simsiiplanch.），又名映山红，属杜鹃花目（ericales）、杜鹃花科（ericaceae）。是常绿灌木。生于海拔500-1200（-2500）米的山地疏灌丛或松林下，为中国中南及西南典型的酸性土指示植物。杜鹃花为著名的花卉植物，具有较高的药用价值和观赏价值。

杜鹃根腐病是杜鹃花常见疾病之一，其发生对园林绿化与经济效益方面造成巨大的经济损失，故对其进行分离与鉴定，进而进行有效防止显得尤为重要。

樟疫霉（phytophthora cinnamomi）属于卵菌门(oomycota)、卵菌纲(oo．mycetes)、霜霉目(peronosporales)、腐霉科(pythia-ceae)、疫霉属(phytophthora)，其可引起樟属植物产生根部腐烂以及枝干溃疡等病害，造成极大损失。

2. 国内外研究现状分析

1 杜鹃花概况

杜鹃花（rhododendron simsiiplanch.），又名映山红，属杜鹃花目（ericales）、杜鹃花科（ericaceae）。是常绿灌木。生于海拔500-1200（-2500）米的山地疏灌丛或松林下，为中国中南及西南典型的酸性土指示植物。杜鹃花为著名的花卉植物，是世界名花，也是中国十大名花之一^[1]，其具有较高的药用价值和观赏价值。

2 杜鹃根腐病的研究进展

3. 研究的基本内容与计划

1 杜鹃根腐病病原菌的分离与鉴定

1.1 杜鹃根腐病的分离、纯化与鉴定

该内容以科赫法则为原理，具体内容与方法如下：在100ml v₈汁中加入1g caco₃，1500r/min离心10min，取上层清液与灭菌水1：9比例稀释，即为液体培养基。在10%的液体培养基中加入1.5%的琼脂粉，加热溶解冷却后即为固体培养基。将配置好的培养基分装入锥形瓶中，不得超过锥形瓶容积的80%。然后置于高压灭菌锅，121℃，灭菌20min。采集新鲜的、具有明显发病症状的杜鹃植株，将发病部位修剪成大概1cm1cm的植物组织块，在超净工作台中，将病健交接部位植物组织切成大概5mm5mm的片状，分别用无水乙醇、75%乙醇和清水浸泡植物组织，浸泡时间30-60秒即可.消毒过后的组织用无菌滤纸将其水分吸干。将病健组织放入v8固体培养基（在实验前应向培养基中加入氨苄、卡纳、利福平和五氯硝基苯），每皿放置4-5片病健组织。然后放入25℃培养箱中培养，待日后观察菌落情况。将病健交接处长出的菌落转移到新鲜的v8固体培养基中，使其再次生长，以获得高纯度的菌落，然后用试管斜面保藏法放入-4℃冰箱进行保存。

4. 研究创新点

杜鹃花为我国著名的花卉植物，其药用价值和美学价值都很高。而杜鹃根腐病是杜鹃花常见疾病之一，其发生对园林绿化与经济效益方面造成巨大的经济损失，故对其进行分离与鉴定，进而进行有效防止显得尤为重要。

樟疫霉可引起樟属植物产生根部腐烂以及枝干溃疡等病害，造成了极大损失。樟疫霉与卵菌门其他疫霉在进化关系上相差甚远，常规的化学药剂很难对樟疫霉起作用。随着分子生物学近几年的飞速发展，越来越多的分子技术可以被利用，为了解疫霉菌的致病机制提供了便利，也是本项目的一大创新。