短小芽孢杆菌HR10萜类合成相关基因的克隆分析及敲除载体的初步构建开题报告

1. 研究目的与意义

大多数树木依靠与菌根真菌形成菌根共生物体来吸收营养。

菌根际受菌根共生体活动影响，是植物-菌根真菌-土壤-微生物及其环境等所形成的特殊微生态系统。

据报道，一些土壤微生物可与菌根真菌相互作用，并以某些特殊方式影响菌根共生体的形成及对宿主植物生理功能产生一定的影响，并且还具有改善菌根际土壤环境等功能。

2. 国内外研究现状分析

早在1989年，reddy等就研究发现用b. subtilis b-2b能够促进洋葱幼苗生长，原因在于该菌株具有使植物根围土壤固有菌群减少的能力。

hu等对一种从油料作物根围分离得到根围促生菌b. subtilis tu-100的促生能力进行了检测，研究发现b. subtilistu-100不仅能够显著地降低由核盘菌所引起的油料作物的病害发生率，而且，还能极大地促进油料作物植株的生长。

不仅表现在促进植株的营养生长，还能促进作物的生殖生长，甚至能够提高果实的质量和品质。

3. 研究的基本内容与计划

（1）短小芽孢杆菌全基因组序列分析（2017.12-2018.1）（2）短小芽孢杆菌HR10萜类物质合成关键酶基因的克隆（2018.1-2018.2）（3）短小芽孢杆菌HR10萜类物质合成关键酶敲除载体初步构建（2018.2-2018.6）

4. 研究创新点

本实验前期从黑松-黄色须腹菌(Rhizopogen luteous，Rl)菌根根际土壤中分离筛选获得一株菌根辅助细菌短小芽孢杆菌HR10，首次通过对数据库中短小芽孢杆菌基因组的比对分析，发现其可以通过甲基赤藓醇‐4‐磷酸途径合成萜类物质，拟通过同源克隆从短小芽孢杆菌HR10中克隆帖类物质合成关键酶的基因，并初步构建其敲除载体，同时对短小芽孢杆菌HR10的转化方法进行探索。

为了解短小芽孢杆菌HR10合成的萜类物质在其促进菌根共生体形成中的作用奠定基础。