灰葡萄孢基因Bct4406的基因功能研究开题报告

1. 研究目的与意义

灰葡萄孢Botrytis cinerea引致多种植物的灰霉病，是植物重要的病原真菌，寄主范围非常广，已成为多种农作物种植上限制产量和品质的重要因素。目前，对于灰霉病的防治主要依赖于化学防治，但农药残留容易造成人员伤害和环境污染，同时由于长期使用同种类型的杀菌剂导致病原菌产生抗药性。解决这一问题的主要途径就是寻找对病原菌抑制效果好，特异性强，对环境友好，对人畜安全，与已有药剂没有交互抗性的新型杀菌剂。

本研究借助PEG介导的灰葡萄孢表达系统，对灰葡萄孢中Bct4406基因克隆和生物学功能进行了初步的功能分析。首先构建载体，然后对灰葡萄孢的遗传体系进行转化，获得突变体，并验证了突变体对菌的生长的影响，这对了解基因Bct4406在灰葡萄孢生长过程中的作用机理有重要意义。

2. 国内外研究现状分析

我国目前对关于灰葡萄孢进行了广泛的研究，从分子水平上探究灰葡萄孢的致病机制可为灰霉病的防治奠定一定的基础。我国也有相关的研究，利用基因敲除和基因互补技术对灰葡萄孢基因BC1G_07326的功能进行初步研究，与此相关的灰葡萄孢研究还有很多，这些都有利于本研究的进行，为本研究对灰葡萄孢的遗传体系进行转化，获得突变体，观察菌的生长的影响提供理论依据。

国外有学者正在研究防葡萄感染灰霉菌的方法，替代目前广泛使用的农药。目前有两种技术，均在实验室获得100%成功率。一种是使用诱导剂来自细菌的天然分子，刺激葡萄树对抗霉菌的防御机制，例如增强细胞壁。第二种方法叫做生物控制，让葡萄树从根部吸收某些天然有益微生物，能抵抗疾病和刺激生长。

3. 研究的基本内容与计划

本研究借助PEG介导的灰葡萄孢表达系统，对灰葡萄孢中Bct4406基因克隆和生物学功能进行了初步的功能分析。首先构建载体，然后对灰葡萄孢的遗传体系进行转化，获得突变体，并验证了突变体对菌的生长的影响，这对了解基因Bct4406在灰葡萄孢生长过程中的作用机理有重要意义。

论文时间安排：（1）2018.3.1―2018.3.15：查阅文献，做预备实验；（2）2018.3.16－2018.5.16：设计引物，构建载体，对灰葡萄孢的遗传体系进行转化，获得突变体，观察突变体对菌的生长的影响，并进行验证；（3）2018.5.21－2018.6.6：整理试验数据，撰写毕业论文，准备答辩。

4. 研究创新点

本研究借助PEG介导的灰葡萄孢表达系统，对灰葡萄孢中Bct4406基因克隆和生物学功能进行了初步的功能分析。设计引物，建立灰葡萄孢的遗传转化体系，对体系的关键参数和性能指标进行优化和探讨，并进行验证。