水稻干旱响应基因rcn1的互作蛋白的筛选与鉴定开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

课题意义：水稻是世界上主要的粮食作物之一，也是耗水量较大的作物[1]。

水分胁迫条件下，水稻的生长发育会受到严重影响，最终导致巨幅减产[2]。

当今世界，水资源问题已经成为全球范围内的焦点问题，因此对水稻相关干旱响应基因进行挖掘研究，提高水稻对干旱胁迫的能力迫在眉睫。

2. 研究的基本内容和问题

研究目标：筛选与水稻干旱相应基因RCN1互作的蛋白，为进一步解析RCN1相应干旱的分子机制奠定基础。

内容：利用酵母双杂、PCR等技术筛选与RCN1基因互作的蛋白进一步利用BiFC、PULL-DOWN技术鉴定其互作拟解决的关键问题：了解与基因RCN1互作的蛋白

3. 研究的方法与方案

研究方法和技术路线：本研究先利用pcr技术和酵母双杂技术初步筛选与rcn1基因互作的蛋白，之后利用双分子荧光互补技术（bifc）、pull-down技术再次鉴定互作蛋白，从多角度确定其互作关系。

实验方案：1.基因克隆和载体构建2.质粒构建和酵母双杂交实验筛选rcn1基因互作蛋白3.利用bifc技术验证互作关系4.再次利用pull-down技术进行体外验证可行性分析：1、实验室科研条件实验室材料齐全、仪器设备先进，指导老师从事多年分子实验研究，有着丰富的分子生物学知识。

2、现有研究基础及应用现状实验室师兄师姐也在同时进行该基因其他方面的研究，现已有构建的cdna文库，后期仍可继续补充完善。

4. 研究创新点

特色点：通过酵母双杂、双分子荧光互补、PULL-DOWN等方法，从多个角度筛选鉴定能够在体内与RCN1发生互作的蛋白。

5. 研究计划与进展

研究计划：2017年7月-12月：阅读相关文献并学习相关知识。

2017年2月：酵母双杂交筛选rcn1互作蛋白，并分析数据。

2017年3月：利用bifc、pull-down技术验证互作关系。