1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
植物病害是影响农作物高产、稳产的重要因素,药物防治对环境污染严重且投入大、效果差。
因此培育抗病品种成为一项重要课题。
烟草在整个生育过程中遭受多种病害及虫害的危害,使其产量与品质受到严重影响,造成了巨大的经济损失烟草病害严重,我国记载的就有近40种。
2. 研究的基本内容和问题
1.研究目标目前已知myb 转录因子作为一种调节蛋白,又称为反式作用因子(即能识别或结合顺式作用元件上的特异蛋白,以提高转录效率)。
myb 基因家族中多数成员在调控某些生理生化过程中一般起正调控作用,而nbmyb57转录因子在响应植物逆境过程中,myb 基因表达量越高,其抵抗逆境的能力越强。
为了提高烟草的抗病性,进而培育出抗病的转基因烟草,本研究拟通过用农杆菌介导法获得抗病转基因烟草,并且筛选获得myb57拟南芥突变体,验证myb57 转录因子在植物抗病性方面的作用。
3. 研究的方法与方案
1. 研究方法本实验中用到分子生物学技术有ctab法提取dna、植物组织培养、构建植物表达载体、pcr扩增技术等。
2. 技术路线构建nbmyb57的植物过表达载体 ↓农杆菌介导的转基因烟草稳定转化 ↓通过抗性筛选和 pcr 鉴定获得稳定遗传的转基因阳性植株 ↓从国外购买拟南芥突变体种子 ↓通过抗性筛选和 pcr 鉴定获得稳定遗传的拟南芥突变体 ↓接种疫霉试验,进行抗病性评价 3. 实验方案3.1植物过表达载体的构建用酶切法将nbmyb57接入质粒转化大肠杆菌。
用卡那霉素抗性lb平板筛选阳性转化子,扩大培养后提取质粒进行双酶切鉴定。
4. 研究创新点
首次培育抗病NbMYB57转录因子的烟草,并验证NbMYB57转录因子在植物抗病方面的作用。
5. 研究计划与进展
2017.8-2017.9 构建植物过表达载体2017.9-2017.11农杆菌介导法转化烟草2017.11-2018.3进行组织培养,抗性筛选和PCR检测,获得遗传稳定的 T1、T2 代阳性转基因烟草2018.3 对筛选出的烟草植株进行接种疫霉试验,进行抗病性评价2018.3-2018.4对拟南芥突变体进行PCR检测和抗病性评价2018.3-2018.5整理数据和论文撰写
课题毕业论文、开题报告、任务书、外文翻译、程序设计、图纸设计等资料可联系客服协助查找。