组氨酸蛋白激酶CA_C2730对丁醇梭菌生物被膜形成的影响研究开题报告

1. 研究目的与意义（文献综述包含参考文献）

一、文献综述1.1胞外聚合物（eps）的简介 胞外聚合物（extracellular polymeric substances，eps）是在一定条件下由微生物（多为细菌）分泌至体外的高分子聚合物，其包括多糖基质、纤维蛋白、脂蛋白等。

其结构如图1所示。

图1胞外聚合物概念模型[1]注：cell细菌细胞；eps胞外聚合物；stability part紧密部分；dispersible part分散部分1.2生物被膜的简介 细菌生物被膜(bacterial biofilm, bf)是细菌为适应自然环境、有利于生存而产生的特有的生命现象, 指细菌吸附于惰性物体如生物医学材料或机体粘膜表面后, 分泌胞外聚合物（extracellular polymeric substance, eps）, 使细菌相互粘连并将其自身克隆聚集缠绕其中形成的膜样物质[2]。

2. 研究的基本内容、问题解决措施及方案

二、主要研究内容和拟采用的研究方法2.1主要研究内容本研究将重点考虑ca_c2730基因对丙酮丁醇梭菌成膜、发酵及耐受性方面的影响。

2.2拟采用的研究方法构建丙酮丁醇梭菌的ca_c2730基因突变菌，或者构建表达抑制菌，通过与过表达ca-c2730的菌株和野生菌株做对比，观察生物膜形成情况和发酵产物情况，来研究丙酮丁醇梭菌eps形成的机制。

clostron 失活质粒的构建方法：①根据 ncbi 数据库收录的丙酮丁醇梭菌的基因序列，助软件设计合适的插入基因位点（http://www.clostron.com），并生成内含子序列。