生物法合成丁三醇关键酶——2-酮酸脱羧酶的研究进展开题报告

 2021-10-23 21:39:19

1. 研究目的与意义(文献综述包含参考文献)

早期生产1,2,4-丁三醇主要是化学法合成,近年来合成技术不断发展完善,成果显著:目前丁三醇的生产主要采用nabh4还原苹果酸二酯或铷和碳催化苹果酸加氢等化学合成法。

这些方法反应条件苛刻,环境污染严重,收率低,提纯难度大【1】。

直到2003年,研究人员首次以酶是实假单胞杆菌(pseudomonas fragi)为宿主,利用菌体自身脱氢酶催化反应合成阿拉伯糖酸及木糖酸,最终反应得率为70%,后期通过基因工程手段在大肠杆菌中异源表达苯甲酰甲酸脱羧酶得到木糖酸,其筛选自恶臭假单胞杆菌(pseudomonas putida),在经过脱水,脱羧,还原三步反应转化为bt,转化率可达到17.5%。

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2. 研究的基本内容、问题解决措施及方案

1.目标酶的表达,结合SDS-PAGE、成像系统灰度扫描分析表达情况;2.研究目标酶的酶学性质3.1,2,4-丁三醇的生物制备,结合液相色谱HPLC分析;4.优化催化反应体系,如脱水酶与脱羧酶的添加比例等。

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