1. 研究目的与意义（文献综述包含参考文献）
文 献 综 述
脂肪酸(ffa)作为一种重要的平台化合物，广泛应用于食品、医药、化工等诸多领域，尤其是在生物燃料[1]（油脂）、商业化的高附加值产品[2]（ω - 3多不饱和脂肪酸）生产中应用。2006年我国脂肪酸总产量达到138万吨，创造了巨大的经济效益和社会效益；随着我国经济持续快速发展，脂肪酸的国内需求量、净出口量和表观消费量正逐年递增。目前，脂肪酸主要由化学合成法制备，但其存在反应步骤繁琐、目标产物选择性差、反应条件苛刻等弊端[3]。因而，生物法合成脂肪酸逐渐成为当今基础性平台化合物的研究热点[4,5]，但此法的合成机制研究尚不成熟，脂肪酸收率远低于理论收率的90%[6], 距离工业化生产水平较远。因此，如何提高生物法合成脂肪酸的产量、收率成为急需解决的关键问题。
脂肪酸的合成主要包括3个过程：1)从葡萄糖出发，经糖酵解作用和三羧酸循环，为机体脂肪酸合成提供底物乙酰coa；2)苹果酸酶催化苹果酸脱羧转化生成丙酮酸，并释放能量，是脂肪酸合成的主要动力来源；3)经脂肪酸从头合成，在脂肪酸合成酶系（fas）的催化下转化生成脂酰coa，脂酰coa在硫脂酶tesa的水解作用下，释放出游离脂肪酸。
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2. 研究的基本内容、问题解决措施及方案
研究问题：本实验所研究的问题：探究敲除阻遏蛋白基因fasr对产脂肪酸的影响。
研究手段及途径：通过重叠pcr技术，合成不完整的fasr基因片段，以穿梭质粒为载体，通过同源重组原理，构建c. glutamicum-△fasr菌株，从而探究脂肪酸生产情况。
首先，接载体制备所需质粒 片段
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