氟脲苷有关物质和含量测定方法的研究开题报告

文 献 综 述

内容提要：氟尿苷属抗代谢类抗肿瘤药物。近年来，氟尿苷在肝癌、直肠癌、食道癌、胃癌、乳腺癌和肺癌等疾病以及对无法手术切除的原发性肝癌治疗效果显著。有关物质以及含量均是评价药物质量的关键指标，本课题针对氟尿苷有关物质以及含量的检测方法进行探讨，并完成相应方法验证。

关键词：氟尿苷 应用 有关物质 含量 高效液相色谱法

1、药物简介

氟尿苷,又名氟尿嘧啶脱氧核苷(floxuridine，FUDR),为氟尿嘧啶类抗癌药,于1979年由AT.Cook等首先合成,FUDR于1980年被正式载入《美国药典》（第20版），目前在国外（尤其是欧美国家）临床大量应用^[1]。氟尿苷在临床上适用于肝癌、直肠癌、食道癌、胃癌、乳腺癌和肺癌等,在治疗肿瘤方面疗效大大优于氟尿嘧啶而被运用于临床^[2]。避光，密闭，25℃保存。配制浓度为25μg/ml氟尿苷对照品溶液，以水作为空白，在190～400nm波长范围内扫描。结果氟尿苷在268nm波长处有最大吸收^[3]。注射用氟尿苷为氟尿苷的无菌粉针剂,当用于制备注射用剂型时，标签应标明样品为无菌的，或在注射用剂型的制备过程中必须经过进一步加工。在室温、避光和冷藏放置条件下，注射用氟尿苷分别溶于0.9％氯化钠注射液和5％葡萄糖注射液中测定含量，24h内明显差异^[1]。

2、氟尿苷的应用

氟尿苷注射后在体内转化为活性型氟苷单磷酸盐，阻断DNA合成，致使肿瘤细胞死亡。腹腔灌注射氟尿苷同时加入地塞米松，可使腹膜微血管、淋巴管扩张，从而加速抗癌药物的吸收，减轻化疗药物的腹膜刺激。毒副反应者较少且肝肾功能无明显损害^[4]。

胃癌是最常见的恶性肿瘤之一，在我国发病率及死亡率居首位，在世界上居第二位， FUDR 为细胞增殖周期特异性药物，为抗代谢类抗肿瘤药，其主要细胞毒作用来自对肿瘤细胞DNA合成的抑制作用，对肿瘤细胞DNA也有作用^[5]。

肝脏是大肠癌最常见的转移器官，晚期大肠癌有60％~70％发生肝转移^[6]，且多数病人的肝脏转移为多发性与弥散性，因此肝转移一旦确立，无论是手术、还是化疗、放疗等其它各种治疗手段均难以取得满意疗效，临床治疗十分被动。因此减少和降低大肠癌术后肝转移的发生，才是积极主动提高疗效的关键^[7]。大肠癌肝转移难题中在原发病灶切除后有效杀灭滞留于门静脉系统和肝内的癌细胞和微小癌灶是预防和减少肝转移发生的关键。氟尿苷(FUDR)是5-Fu的衍生物，两者具有相似的抗肿瘤作用机制，与其他抗癌药物相比，FUDR具有极高的肝提取率(肝动脉输注时为94％～99％)，是一个理想的肝动脉输注药物，并且FUDR肝动脉输注后肝静脉药物浓度亦明显增高是全身给药后的4倍，不但杀伤动脉血供的微小癌灶同时杀伤静脉窦内滞留的微小癌栓^[8]。

3、有关物质和含量的检测方法

药物的含量系指药物中所含主成分的量，是评价药物质量的重要指标。药品的含量测定是指采用规定的实验方法对药品（原料以及制剂）中有效成分的含量进行的测定。可供药物含量检测的分析方法主要包括容量分析法、光谱分析法和色谱分析法^[9]。其中容量分析法操作简便、结果准确、方法耐用性高，但方法缺乏专属性，主要适用于对结果准确度与精密度要求较高的样品测定；光谱分析法简便、快速，灵敏度高、并具有一定的准确度，但方法专属性稍差，主要适用于对灵敏度要求较高、样本量较大的分析项目；色谱分析法则具有高灵敏度与高专属性、并具有一定的准确度，本法主要适用于对方法的专属性与灵敏度要求较高的复杂样品的含量测定^[10]。目前已有对于氟尿苷含量测定的研究，取样品约800mg，精密称定，加二甲基甲酰胺80ml溶解，采用饱和玻璃甘汞电极用四丁基氢氧化铵滴定液（0.1N）滴定至终点，并将滴定结果用空白试验校正。每1ml四丁基氢氧化铵滴定液（0.1N）相当于24.62mg的氟尿苷^[11]。

有关物质系药品中除主成分以外的杂质，它可能是原料药合成过程中带入的原料、中间体、试剂、分解物、副产物、聚合体、异构体，以及不同晶体、旋光异构的物质，也可能是制剂生产过程或在贮藏、运输、使用过程中产生的降解产物等。由于有关物质的含量较少，所以选择专属性强、灵敏度高、重现性好的检测方法至关重要。有关物质常用色谱法进行检查。目前常用的方法有HPLC法和TLC法。HPLC法检测有关物质的方法有：(1)杂质对照品法(适用于已知杂质)；(2)主成分自身稀释对照法(适用于一般杂质检查，杂质成分少且尚不能取得其对照品，简称自身对照法)；(3)归一化法(现已不多用)。前法为外标法、定量检测；后两法均为限量检测。自身对照法又可分为加校正因子计算和不加校正因子计算。目前，国内多采用后法^[12]。目前已有对于氟尿苷有关物质测定的研究，取样品适量，加水溶解并稀释制成每1mL中约含氟尿苷0.4 mg的溶液，作为供试品溶液;精密量取供试品溶液适量，加水稀释制成每1mL中约含氟尿苷4μg的溶液，作为对照溶液，取对照溶液20μL，注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分色谱峰的峰高约为满量程的20%;精密量取供试品溶液和对照溶液各20μL，分别注入液相色谱仪，记录色谱图。供试品溶液的色谱图中如显杂质峰，单个杂质的峰面积不得大于对照溶液主峰面积1/2倍(0.5%)，各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积的1倍(1.0%)。

4、高效液相色谱原理与发展

液相色谱法是一种快速有效的有机化合物分析技术，在分析测定有机化合物方面，以其快速、灵敏、选择性好的特点倍受分析工作者青睐，在环境监测、卫生防疫、石油化工、食品生产等行业广泛应用。高效液相色谱仪分离原理是一个物理过程。流动相携带着待分析化合物和其他一些共存物质流过色谱柱^[13]。利用不同物质在固定相上的保留时间不同。从而出峰时间不同而达到分离。利用保留时间定性，峰高或者峰面积定量。在将分离后的各个成分依次通过一紫外检测器时就可检测出各化合物的浓度来。目前应用最广的是正相色谱。即固定相的极性大于流动栩的极性，它具有高效、快速、准确的优点，适合分析各种组成的环境样品^[14]。

虽然液相色谱检测器已经获得长足的进步，但与气相色谱检测器相比进展还是相对滞后。随着科学技术的迅猛发展，使用单一检测器，往往难以得到完全的信息，除了对现有检测器利用新出现的技术进行改造以提高性能外，将不同的检测器联用是一个可行有效的方法^[15]。近几年的实际应用中，色谱联用仪器不断出现，互相取长补短，解决了大量实际问题。1903年至今色谱技术已有百年的发展历史。经过科学家几十年的不懈努力，现代高效液相色谱技术得到了不断的改进和完善，可以相信液相色谱检测器的快速发展将会对高效液相色谱检测技术广泛应用做出更加重要的贡献^[16]。

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