1. 研究目的与意义(文献综述包含参考文献)
文 献 综 述摘要:磷脂酶d是一类特殊的酯键水解酶,它对细胞的结构和稳定性有很重要的作用 ,而且调控许多重要的细胞生理功能。
文章概述了磷脂酶d的结构特点、作用、影响酶活性因素以及应用和前景等。
关键词:磷脂酶d;酶性质;研究进展磷脂酶d (phospholipased,简称pld )即磷脂酞胆碱磷脂水解酶(ec3.1.4.4),属催化磷酸二脂酷键水解和碱基交换反应的一类酶的总称。
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2. 研究的基本内容、问题解决措施及方案
拟采用的研究方法,实施方案:1. 通过本课题的研究,首先构建磷脂酶d在大肠杆菌中的过表达系统,实现磷脂酶d在宿主菌bl21(de3)中的大量表达,比较构建菌株与野生型菌株的磷脂酶d的表达量,尽可能高的实现磷脂酶d的成产量。
所用的表达质粒为pet-28a,表达宿主为大肠杆菌bl21(de3)。
通过sds-page蛋白电泳验证目的蛋白的表达效果,检测可溶性蛋白的表达量,目的蛋白是否形成包涵体。
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