4-羟基喹啉在氨基酸产品中含量测定方法学验证开题报告

1. 研究目的与意义

氨基酸是构成蛋白质的基本单位，广泛用于食品、医药、添加剂及化妆品行业。

随着生物工程技术产业逐渐成为21世纪全球的主要产业之一。

目前全世界氨基酸产品每年的产量为100万t，而需求总量却高达800万t，从组成上看，氨基酸在各行业的占用比例也在逐年增加。

2. 课题关键问题和重难点

关键问题：如何建立符合规定的测定氨基酸产品中4-羟基喹啉的方法。

难点：（1）如何建立合适的质谱（DP、CE）条件用于检测方法（信号强度是否较强和峰形是否好看，离子对选择是否合适等）（2）如何建立合适的色谱（色谱柱的选择，流动相）条件用于检测方法（标准曲线是否标准，内标是否稳定，峰形是否好看，有无拖尾等）（3）空白对照品（色氨酸原料）中也含有一定4-羟基喹啉，用什么检测方法可以避免这部分杂质的影响（4）由于样品中含有各种氨基酸，如何进行梯度洗脱，以避免氨基酸对仪器以及结果的影响（5）如何进行方法重复性的验证（6）如何进行方法耐用性的验证（7）如何对实验数据和结果进行处理和评价

3. 国内外研究现状（文献综述）

1.复方氨基酸注射液用于蛋白质摄入不足、吸收障碍等氨基酸不能满足机体代谢需要的患者。

有八种氨基酸机体自身不能合成，又为机体合成蛋白质所必须，故称为必需氨基酸，它们是亮氨酸、异亮氨酸、赖氨酸、苏氨酸、色氨酸、蛋氨酸、缬氨酸、苯丙氨酸。

有几种氨基酸如精氨酸、组氨酸在人体合成速度相当低，新生儿往往不能自身合成。

4. 研究方案

要论证4-羟基喹啉在不同氨基酸基质中含量分析方法，其专属性、精密度、线性、准确度、范围、定量限和耐用性均符合规定，具体论证过程如下：(1)使用空白对照法验证方案的专属性；(2)将样品进行稀释梯度，在色谱中作标准曲线，每个浓度作3个平行样，r≥0.990，结果要满足线性关系；(3)将一定浓度的4-羟基喹啉加入含有色氨酸的基质中，进行加样回收率考察以确定方案的准确度，要求回收率均在80%-120%，RSD≤20%；(4)对照品贮备溶液一定时间内保持稳定，在一定范围内变化色谱条件时，应均满足相应的系统适用性要求，论证方案的耐用性。

5. 工作计划

第1-2周：确定毕业论文题目，查阅相关文献资料；第 3周：熟悉公司工作流程以及部门标准操作规程，并进行理论和技能培训；第 4周：根据相关文献，完成文献翻译和开题报告等工作，初步确定研究方案；第 5周：对氨基酸注射剂样品进行样品前处理，并完成UPLC-MS/MS方法的建立；第 6周：进行产品中杂质的检测，观察主峰和杂质峰的纯度，记录实验数据；第 7周：分析实验数据，判定分析方法是否需要进一步优化，并重新进行测试；第8-9周：进行重复性实验，并进行方法学验证；第 10 周：解决实验中遇到的问题；第 11 周：实验数据汇总，完成实验报告交公司主管审核；第 12 周：完成毕业论文初稿； 第 13 周：在主管和导师指导下，完善毕业论文；第 14 周：做好相应的PPT，进行答辩资格审核；第 15 周：完善PPT，准备毕业答辩；第 16 周：提交论文，进行毕业答辩。