1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
本课题的意义、国内外研究概况、应用前景等(列出主要参考文献)
本课题意义:三磷酸腺苷在生物体中具有电活性, 因此用现代电化学技术研究其电化学行为具有重要的理论意义和实际应用价值。由于电致化学发光检测具有灵敏度高, 选择性好的特点, 无疑是检测生物体中生物活性物质的强有力工具, 如果它能与高效液相色谱法(hplc)、毛细管点用(ce)等现代分离技术相结合, 用于检测三磷酸适配体将有助于人们加深三磷酸腺苷对人体产生影响的认识。
国内外研究概况:基于电致化学发光方法的研究较少,南京大学陈洪渊教授课题组报道了基于无线双极电极构建了检测癌细胞中aip浓度的方法。天津市长征医院王雪艳等在beckman 5010 型毛细管电泳仪上, 采用熔融石英毛细管柱, 以0 .025 mol/l 磷酸氢二钠为电极缓冲液(用1mol/l 氢氧化钠液调ph 值至10.2), 检测波长为214 nm , 25 ℃及21 kv 的条件下进行定量分析。
2. 研究的基本内容和问题
研究目标:用电致化学发光法检测出三磷酸腺苷适配体的浓度。
研究内容:探索检测三磷酸腺苷适配体的最佳实验条件,用电致化学发光法作出三磷酸腺苷适配体的标准曲线。
拟解决的关键问题:ito电极上容易发生侧漏等情况,导致结果不准确。
3. 研究的方法与方案
研究方法:电致化学发光法先作出三磷酸腺苷适配体的标准曲线,再检测三磷酸腺苷适配体的样品的发光度,根据标准曲线求出样品浓度。
技术路线:电致化学发光法先作出三磷酸腺苷适配体的标准曲线,再检测三磷酸腺苷适配体的样品的发光度,根据标准曲线求出样品浓度。
实验方案: 1. ito电极放在aptes中活化处理,在导电面滴加50ul核聚糖溶液,晾干,然后放在2.5 %的戊二醛溶液中。组装捕获dna溶液。
4. 研究创新点
基于电致化学发光方法检测三磷酸腺苷适配体的研究较少,该课题在此基础上研究有利于加深人们对这方面的认识。
5. 研究计划与进展
2014.10-2015.1 查阅文献资料,确定实验方案及方法
2015.3-2015.4 探索实验的最优条件,包括探索核聚糖的最优浓度,捕获dna的最优用量。
2015.4-2015.5 制作三磷酸腺苷的标准曲线,检测样品atp的发光度。
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