1. 研究目的与意义(文献综述包含参考文献)
一、选题的目的和意义人参被认为是百草之王,东北三宝之一,人参皂苷是其主要药效成分。
稀有人参皂苷如ppd型的ck,rh2和rg3以及ppt型的f1和rh1指在人参中含量极低的一类具有较少的糖基化修饰的皂苷。
药理学研究[ 1-4 ]表明,有些稀有人参皂苷能保护细胞凋亡、逆转白血病细胞耐药性、抑制肿瘤细胞的增殖、抗氧化、抗炎、免疫调节等。
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2. 研究的基本内容、问题解决措施及方案
1、主要研究内容(1) 糖基转移酶产rh2反应体系的构建;(2) 固定条件的优化以提高稀有人参皂苷生物合成的转化率。
2、拟采取的研究方法通条件催化过蛋白质理性进化获得的糖基转移酶为催化剂进行多反应的研究,确定游离酶催化rh2最有转化率的条件;以此为基础通过酶固定化进一步实现rh2的合成。
(1)糖基转移酶bs-gt合成rh2活性分析;(2)固定化酶体系的构建及催化条件的优化;(3)酶3d模型分析,以表面氨基酸序列选择固定化载体及载体修饰条件的优化;(4)固定化后酶活及吸附量的优化。
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