产青霉素酰化酶菌株的筛选、克隆及表达开题报告

1. 研究目的与意义（文献综述包含参考文献）

青霉素酰化酶(penicillin acylase，ec3.5.1.11)又称为青霉素酰胺酶或青霉素氨基水解酶，是β-内酰胺抗生素酰基转移酶家族的一个亚类。

该酶为可逆酶，一般在酸性或中性条件下可以催化6-氨基青酶烷酸(6-apa)[1]、7-氨基脱乙酰头孢烷酸(7-adca)母核和酰基侧链发生酰基化反应制备半合成抗生素[2]；而在偏碱性条件下可以催化青霉素和头孢菌素水解成为6-apa和7-adca，它们是制备半合成β-内酰胺抗生素所需的关键中间体。

因此，青霉素酰化酶在医药工业中扮演了极为重要的角色，在生产新型抗生素方面有着较高的应用价值，本课题的主要研究目的，就是筛选获得一株青霉素酰化酶，并对其编码基因进行克隆表达。

2. 研究的基本内容、问题解决措施及方案

青霉素酰化酶具有良好的催化酰化/去酰化特性，因此在医药工业中发挥着重要的作用，主要应用于半合成青霉素和头孢菌素类的工业生产，可以催化制备高效、广谱、适用于不同用途的新型β-内酰胺抗生素。

尽管青霉素酰化酶的研究以开展多年并取得重要进展，但基础性的深入研究和大规模工业生产应用所需的优良酶类仍然缺乏，因此筛选性能更优越的青霉素酰化酶产生菌对酶法合成β-内酰胺类抗生素具有重要意义。

本课题主要研究内容：1.通过青霉素酰化酶底物类似物2-硝基-5-苯乙酰胺基苯甲酸(nipab)筛选获得青霉素酰化酶的生产菌株。