热灭活对血清支持衣原体生长能力的影响开题报告

1. 研究目的与意义

现状及趋势：衣原体是一类严格在真核细胞内寄生、具有独特的双相发育周期并能通过细菌滤器的革兰氏阴性病原体。它广泛分布于人和动物中，具有一定的致病性。培养衣原体的培养基包含血清，缓冲液，维生素，抗生素等。每种成分的变化都可能会影响衣原体的生长增殖能力。本实验设计就是为了研究热灭活的血清条件对于衣原体生长增殖能力的影响，以此选择适宜的血清条件进行衣原体的培养和收获。

意义和价值：探究热灭活的血清条件对衣原体生长增殖能力的影响，选择合适的血清条件进行衣原体的培养与收获

参考文献：[1] 肖健, 王川, 吴移谋. 衣原体包涵体膜蛋白的结构特征及生物学功能研究进展[j]. 中国人兽共患病学报, 2019(4):338-344.[2] 程永婷,贾天军. 衣原体分泌蛋白的研究进展[j]. 中国病原生物学杂志, 2016(5):480-480.[3] c. w. stratton and s. sriram. association of chlamydia pneumoniae with central nervous system disease[j]. microbesand infection, 2003, 5(13):1249–1253[4] dautry-varsat a , subtil a , hackstadt t. recent insights into the mechanisms of chlamydia entry[j]. cellular microbiology, 2010, 7(12):1714-1722.[5] bao x, gylfe a, sturdevant gl, et al. benzylidene acylhydrazides inhibit chlamydial growth in a type iii secretion- and iron chelation-independent manner[j]. journal of bacteriology, 2014, 196(16):2989-3001.[6] fan h. blindness-causing trachomatous trichiasis biomarkers sighted[j]. investigative ophthalmology visual science, 2012, 53(6):2560.[7] bruinink a, tobler u, hlg m, et al. effects of serum and serum heat-inactivation on human bone derived osteoblast progenitor cells[j]. j mater sci mater med, 2004, 15(4):497-501.[8] tomislav m . molecular mechanisms of chlamydia trachomatis resistance to antimicrobial drugs[j]. frontiers in bioscience, 2018, 23(2):656-670.[9] giard dj. routine heat inactivation of serum reduces its capacity to promote cell attachment[j]. in vitro cell dev biol, 1987, 23(10):691-7.[10] balakrishnan a , wang l , li x , et al. inhibition of chlamydial infection in the genital tract of female mice by topical application of a peptide deformylase inhibitor[j]. microbiological research, 2009, 164(3):338-346.[11] yan y , silvennoinen-kassinen s , leinonen m , et al. inhibitory effect of heparan sulfate-like glycosaminoglycans on the infectivity of chlamydia pneumoniae in hl cells varies between strains[j]. microbes and infection, 2006, 8(3):866-872.[12] rahnama m, fields k a. transformation of chlamydia: current approaches and impact on our understanding of chlamydial infection biology[j]. microbes and infection, 2018, 20(7-8):445-450.

2. 研究内容和问题

研究内容：1、10%热灭活的血清与未进行热灭活的血清对衣原体生长增殖能力的影响2、不同浓度（5%和10%）热灭活的血清对衣原体生长增殖能力的影响3、不同品牌血清热灭活对衣原体生长增殖能力的影响

解决问题：1、热灭活与未进行热灭活的血清血清对衣原体生长增殖能力的影响2、5%和10%热灭活的血清浓度对衣原体生长增殖能力的影响3、sigma血清与bi血清热灭活后对衣原体生长增殖能力的影响

必须完成的任务：1、热灭活的血清与未灭活的血清对衣原体生长增殖能力的影响2、不同浓度（5%和10%）的热灭活的血清对衣原体生长增殖能力的影响3、不同品牌血清热灭活后对不同衣原体生长增殖能力的影响

3. 设计方案和技术路线

研究方法：HeLa S3、HEp-2细胞的传代培养，HeLa S3 、HEp-2细胞的复苏和冻存，Ct L2、MoPn、Cpn AR39 的培养，免疫荧光，滴度测定，DAPI 染色，Evans Blue 染色，统计学分析技术路线：在不同的热灭活血清条件下培养细胞→在不同的热灭活血清条件下感染衣原体→测定子代滴度值→比较热灭活血清条件对衣原体生长增殖过程的影响→热灭活血清条件对不同衣原体生长增殖能力的影响

4. 研究的条件和基础

研究工作条件和基础:本项目将依托于南通大学药学院和南通市生物医药重点实验室进行。实验室设有分子生物学、细胞工程、组织工程等研究室，拥有二氧化碳培养箱、超净工作台、普通pcr 仪和定量pcr 仪、超声破碎仪、超速和高速低温离心机、超低温冰箱、电泳仪、电转移仪、高效液相色谱仪、全自动紫外分析仪、自动层析系统、激光共聚焦显微镜、荧光显微镜、流式细胞仪、图象分析仪、真空冷冻干燥仪、化学发光检测仪等仪器设备，可为本研究有关项目的实施提供保障。