甜叶菊同源四倍体的扩繁与移栽开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

甜叶菊(steviurebuudiuuubertoni)为菊科多年生草本植物[1]，是我国70年代从国外引进并发展起来的菊科品种。叶片中含有的甜叶菊糖普为非糖质、无毒副作用、低热值的天然甜味剂，甜味为蔗糖的300倍，是一种新型糖源[2]。此外，甜叶菊糖普还能防治糖尿病、肥胖症及小儿龋齿等，是此类患者的理想甜味剂[3]。甜叶菊的繁殖方式主要有播种、扦插等，但是传统的繁殖方式存在播种成活率不高、扦插植株根系较弱等缺点[4-7],口前在组织培养方而，愈伤组织[8-9]及不定芽[10-11]诱导方而已经有一定的成果。通过组织培养能尽量避兔外界环境的干扰，且繁殖速度快、效率高、再生植株遗传了优良品质，本实验为进行大量繁殖优良品种提供了依据。

参考文献：

[1]胡选萍，张晓娟.山药离体脱毒技术探讨[j].安徽农业科学，2008,36(34):14896一14897.

2. 研究的基本内容和问题

1、研究目标本项目拟在建立甜叶菊无菌快繁体系的基础上，采用离体同源四倍体诱导的方法获得甜叶菊同源四倍体种质，并采用形态鉴别、根尖染色体鉴定相结合的方法对获得种质进行鉴定，建立同源四倍体株系，为甜叶菊优良品种选育创制倍性育种材料。2、研究内容（1）建立甜叶菊无菌快繁体系；（2）甜叶菊快繁体系评价（3）甜叶菊培养技术体系的建立和优化及田间扩繁。3、拟解决的关键问题；（1）甜叶菊在田间栽培实验中扦插成活率。解决方法：在田间采用多次扦插，针对不同的茎节比例反复实验，找到最佳扦插方案。

3. 研究的方法与方案

材料和方法

外植体的选择是植物离体培养成功的关键环节之一，到目前为比人们已成功利用甜叶菊种子、茎尖叶片、叶柄和茎段等获得了再生植株，其中茎尖是甜叶菊组织培养最理想的外植体材料。甜叶菊最适外植体的选择，应依不同的实验目的而定，若为了获取愈伤组织，叶片、茎节和茎段是较为理想的外植体材料;但若要繁殖大量试管苗，茎尖则是最为理想的材料。

植物组织培养中，外植体灭菌、消毒剂种类及消毒时间对外植体存活率都有明显影响，消毒时间过长可能引起外植体褐变而降低存活率，过短则达不到消毒目的。甜叶菊外植体常用的消毒剂为75%酒精和0.1%hgcl2，一般将70%-75%酒精和0.1%hgci2配合使用。取当年生或宿根植株上已展开的幼叶，洗净后用0.1%hgci2消毒3-5min，用无菌水冲洗4-5次，然后用整叶或将叶剪成0.25cm大小接种于固体培养基上成功诱导分化出完整甜叶菊植株。将甜叶菊顶芽和叶柄，先用自来水冲洗净，再用10%的洗衣粉溶液浸泡5min后，经70%的酒精表而消毒2min，用0.1%的hgci2溶液消毒5min，然后用无菌水冲洗3-5次，消毒效果较好。研究表明，70%酒精处理15-30s 0.1%hgci2处理4min较为适合甜叶菊茎段外植体灭菌[9]。

4. 研究创新点

创新之处

1.材料创新

经过cnki中国知网数据库系统检索，关于甜叶菊的多倍体扩繁技术报道不健全

5. 研究计划与进展

2015.11-2016.3将甜叶菊多倍体无菌扩繁。

2016.3-2016.5进行大田移栽并进行扦插实验。

2016.5-2016.6进行株系品质检验。