1. 研究目的与意义
一、研究目的和意义:
细胞衰老对肝纤维化的调控是21世纪生命科学研究的前沿和热点。hsc活化在肝纤维化发生与发展中扮演重要角色,诱导hsc的衰老可阻断其增殖活化,对肝纤维化的防治意义重大。本论文通过体外实验研究curcumin调控活化型hsc衰老的分子机制,对于抗肝纤维化的机制研究提供一定的理论依据。
二、研究内容:
2. 文献综述
[1]senooh,yoshikawak,moriim,miuram,imaik,mezakiy.hepaticstellatecell(vitamina-storingcell)anditsrelative--past,presentandfuture.cellbiolint2010.34(12):1247-1272.
[2]ramachandranp,iredalejp.reversibilityofliverfibrosis.annhepatol2009.8(4):283-291.
[3schraderj,fallowfieldj,iredalejp.senescenceofactivatedstellatecells:notjustearlyretirement.hepatology2009.49(3):1045-1047.
3. 设计方案和技术路线
体外培养hsc,设空白对照组、阳性对照组(依托泊甙2μg/ml)、药物干预组,作用24h后检测。
1.细胞衰老染色试剂盒检测hsc衰老标志物sa-β-gal的表达;
2.细胞周期分析:应用annexinv/pi凋亡双染实验,以流式细胞仪测定衰老hsc所处细胞周期;
4. 工作计划
1.通过查阅文献对肝纤维化有了基本认识,并且学习了curcumin在调控活化型hsc衰老进而抗肝纤维化方面相关知识。
2.根据设计的方案进行实验。
3.整理实验数据。
5. 难点与创新点
本课题应用多种先进的分子生物学技术手段,如Westernblot、Real-timePCR、免疫荧光染色等,且还运用多种先进仪器如流式细胞仪、荧光显微镜等。相比于传统的实验方法具有速度快、运用范围广的优点,能弥补实验方法难以克服的缺点。
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