1. 研究目的与意义
内容:1、本文介绍了重组人促性腺激素释放激素绿脓杆菌外毒素a双突变体融合蛋白(mgp),是一种癌症治疗的新型靶向重组毒素药物。
2、mgp靶向治疗肿瘤的作用机理
3、对mgp重组蛋白的分离纯化进行研究并通过电泳检测蛋白含量来 确定最佳工艺流程。
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2. 文献综述
绿脓杆菌外毒素a及其重组毒素的研究进展
摘 要:绿脓杆菌(pe)又称铜绿假单胞菌,当机体免疫功能受损或烧伤细菌感染或外科手术时可引起严重的甚至致死性的感染。绿脓杆菌的多种菌体成分和产物与其致病性有关,其中,外毒素a的毒性最强,是主要致病因子。绿脓杆菌外毒素a有三个结构功能区,有其广泛的应用但亦有其优点、弊端。其重组毒素重组人促性腺激素释放激素-绿脓杆菌外毒素a双突变体融合蛋白(mgp)的靶向作用机制对治疗恶性肿瘤方面具有重大意义,具有广阔的前景。
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3. 设计方案和技术路线
高压破碎→ 离心→ Ni柱柱纯化→ 稀释复性→ Ni柱回收→ G-25脱盐→ 酶切→ Ni柱穿透→ G25脱盐→ DEAE柱浓缩 → G75精致
4. 工作计划
1. 2022.3.13.9 查阅相关课题的文献,完成开题报告
2. 2022.3.104.25 纯化实验
3. 2022.4.264.30 分析和处理实验数据
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5. 难点与创新点
1、本实验中所用试剂、器材均需除菌、灭菌处理,保证无菌操作,降低了外来菌体对实验的影响。
2、本实验通过多步的实验过程优化工艺条件,得到最简单实用的工艺流程,为以后的工业生产提供了依据。
3、为了更好的获取目的蛋白,本实验中采用电泳测定目的蛋白含量,为其蛋白含量控制提供了科学依据
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