耐有机溶剂β-葡萄糖苷酶产生菌筛选及克隆表达开题报告

1. 研究目的与意义（文献综述包含参考文献）

糖苷酶是一类水解各种含糖化合物中的糖苷键生成单糖、寡糖或糖苷类复合物的酶。糖苷类化合物是自然界中一类重要的化合物, 在生物、医药、食品等领域均有着广泛的利用价值。但是目前天然化合物在医药领域的应用还存在一些局限，如水溶性差，生物利用度低等。通过对天然化合物进行结构修饰可以显著改善其水溶差的问题，增加其生物利用度。目前对天然化合物进行结构修饰的主要手段有化学法和生物转化法(biotransformation) 化学法通过对先导化合物中活泼反应位点的修饰得到一系列的衍生化合物,经过活性测试及构效关系研究,确定结构中的药效团,然后对药效团以外的部位进行优化使活性和生物利用度提高^[1]。生物法是利用生物体系或其产生的酶制剂对外源性化合物进行结构修饰的生物化学过程。生物转化法具有一些化学法无可比拟的优点,如反应条件比较温和;无需保护和脱保护,区域选择性和立体选择性高;能够进行一些化学方法难以进行的反应,不污染环境等。目前生物转化修饰结构已涉及羟基化、环氧化、糖基化、异构化、酯化、水解、重排、醇和酮之间的氧化还原、脱氢反应等多种反应类型,其中对天然化合物进行糖基化修饰一直是进来的研究热点。

1.1糖基化方法

1.化学合成

2. 研究的基本内容、问题解决措施及方案

本课题致力于筛选到耐有机溶剂的β-葡萄糖苷酶产生菌株并进行菌种鉴定，进而克隆其β-葡萄糖苷酶基因并实现其在大肠杆菌内的高效表达。

需解决的问题：

1.β-葡萄糖苷酶产生菌株的筛选。