重组人纤溶酶原的纯化工艺研究开题报告

1. 研究目的与意义

内容：1.通过rk5在酵母菌中的表达，介绍分析重组人纤溶酶原的纯化工艺。

2.列出本实验所需器材、溶剂，所需条件。

3.本实验的操作流程：离心，透析→超滤→sp柱层析→sp柱层析→qhp柱层析→source q柱层析→原液4.通过实验数据及电泳图，分析研究rk5的纯化工艺。

2. 文献综述

重组人纤溶酶原的研究 摘要：重组纤溶酶原rk5(recombinant kringle 5，rk5)是将抑制mmp的小肽和k5氨基酸序列融合在一起，形成一个新的多肽分子。

这个多肽分子100氨基酸左右，具有双靶点的功能，既能作用于mmp，抑制其活性，又能作用于内皮细胞，抑制其增殖和转移。

重组纤溶酶原rk5就是基因工程基础上研发的多靶点药物，国内还未开展临床阶段的研究。

3. 设计方案和技术路线

离心，透析→超滤→SP柱层析→SP柱层析→QHP柱层析→Source Q柱层析→原液

4. 工作计划

20115年3月1-7号查找资料，撰写开题报告2022年3月9号实验前准备2022年3月15号开始实验2022年5月实验数据整理与分析2022年5月15号开始写论文

5. 难点与创新点

本品将抑制基质金属蛋白酶（Matrix Metalloproteinase, MMP）的10肽和K5序列融合在一起，采用自己改造的适合高拷贝的整合型表达载体pPIC9K转化入毕赤酵母中进行表达，筛选高表达菌株，再经过发酵、纯化、冻干而成的；为多肽（表达体系为毕赤酵母系），分子包含了N端抑制金属蛋白酶的十肽序列以及后面82个氨基酸序列（angiostatin第5个kringle区）；