1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
食盐是人类生存最重要的物质之一,它在人体内有维持细胞渗透压、参与酸碱平衡调节、氯离子参与合成胃酸等作用。
但研究也显示,过量的食用食盐可能会使人类患上高血压等多种疾病,为此,国内外学者对于低盐食品进行了多方面研究。
近几年,乳化肠等乳化型肉制品被消费者所熟知,并呈快速增长趋势。
2. 研究的基本内容和问题
本试验首先比较三种不同类型肌肉(LD、PM和SS)在相同酸碱度(pH 6.5)和正常钠含量(0.6M NaCl)下的肌原纤维蛋白与大豆油乳化体系营养学特性(模拟消化的脂肪消化情况),再进一步取较优的肌肉类型降低食盐含量,添加不同量的卡拉胶进行模拟消化,用NaOH滴定以测定其脂肪酸产生的情况,并使用十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)观察蛋白质消化吸收情况,进一步阐述多糖对肌原纤维蛋白乳化体系营养学特性的影响,旨在为生产低盐低脂乳化型肉制品提供理论依据。
3. 研究的方法与方案
研究方法:○1设置不同肌肉类型3组:ld、pm、ss(0.6m nacl,ph6.5)○2设置相同肌肉类型(ld)0.6m nacl1组,0.3m nacl5组,卡拉胶添加量分别为肌原纤维蛋白质量的0%、0.15%、0.20%、0.25%、0.30%(w/v).○3根据doerscher和韩敏义的方法,略加改进,提取猪肉肌原纤维蛋白.○4利用双缩脲法测定肌原纤维蛋白提取的浓度,并配置10mg/ml的蛋白溶液.○5添加胃蛋白酶、胰蛋白酶和脂肪酶进行模拟消化.○6采用经典的laemmli[59]非连续性sds-page系统.技术路线及实验方案:1. 肌原纤维蛋白的提取根据doerscher等[3]和韩敏义[4]的方法并稍加修改:150g左右解冻的碎肉加入4倍体积的僵直提取缓冲液(100mmoll-1 tris, 10mmoll-1 edta, ph 8.3)中,分别以中、高速均浆45s左右,再在1,500g下低温(4℃左右)离心20min,并收集沉淀。
把沉淀分散在4倍体积的标准盐溶液中(standard salt solution, sss)(100mmoll-1 kcl, 20mmoll-1 na2hpo4/nah2po4, 2mmoll-1 mgcl2, 1mmoll-1 egta, 1mmoll-1 nan3, ph 7.0)高速分散几秒,过滤,以1,500g低温(4℃左右)离心10min,收集沉淀,并重复此步骤。
将沉淀重新加入4倍体积的含1% triton x-100的标准盐溶液(ph 7.0)中溶解,高速分散几秒,以2,000g低温(4℃左右)离心10min,收集沉淀,并重复此步骤。
4. 研究创新点
模拟胃肠液消化肌原纤维蛋白乳化体系,通过NaOH的消耗量来观察游离脂肪酸的消化情况,并使用SDS-PAGE来判断蛋白质的分解情况。
5. 研究计划与进展
2013.10.1-10.30 确定选题,收集相关文献与资料,确定实验方案2014.4.1-4.7 准备相关材料,检查设备仪器2014.4.8-4.20 预实验2014.4.21-4.23 实验方案的调整2014.4.24-5.10 实验的进行
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