产蛋白酶乳酸菌的筛选及蛋白酶活力研究开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

1 本课题的意义、国内外研究概况、应用前景等（列出主要参考文献）1.1 研究意义乳酸菌一方面是对人体有益的微生物，具有独特的功能性；另一方面能够有效抑制杂菌，改进食品的品质和营养，因此在食品工业上也有着非常重要的地位。

通过对乳酸菌的分类、生物学特征和生理功能的了解，以及对乳杆菌胞壁蛋白酶的分离纯化方法的简介，以此作为乳酸菌蛋白酶分离提取的深入研究的理论基础。

通过进一步了解乳酸菌及其蛋白酶的适宜分离提取的条件，能够更加深入地了解其功能性，同时也有利于乳酸菌及其蛋白酶今后的工业化生产。

2. 研究的基本内容和问题

2 研究的目标、内容和拟解决的关键问题2.1 目标筛选出蛋白酶活性强的乳酸菌菌种，提取其胞壁蛋白酶，保藏相应菌种2.2 内容本实验以乳酸菌，大豆为主要材料，通过接种发酵、蛋白电泳方法、ca2 -free提取法筛选蛋白酶活性强的乳酸菌并提取其相应蛋白酶。

2.3 拟解决的关键问题2.3.1 通过sds-page电泳从已有的300多个乳酸菌菌种中筛选出蛋白酶活性强的。

通过和marker条带的对比，筛选出条带变浅、甚至消失的样品，确定菌种。

3. 研究的方法与方案

3 研究方法、技术路线、实验方案及可行性分析3.1 研究方法3.1.1 sds-page电泳法（十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳法）在蛋白质混合样品中各蛋白质组分的迁移率主要取决于分子大小和形状以及所带电荷多少。

sds是一种阴离子表面活性剂，加入到电泳系统中能使蛋白质的氢键和疏水键打开，并结合到蛋白质分子上，使各种蛋白质sds复合物都带上相同密度的负电荷，其数量远远超过了蛋白质分子原有的电荷量，从而掩盖了不同种类蛋白质间原有的电荷差别。

此时，蛋白质分子的电泳迁移率主要取决于它的分子量大小，而其它因素对电泳迁移率的影响几乎可以忽略不计。

4. 研究创新点

4 特色或创新之处对于乳酸菌的研究和应用主要集中在其产酸能力上，但是其蛋白酶所具有的生理功能以及在食品、药品和饲料等方面的应用不容忽视。

通过对乳酸菌分泌蛋白酶能力的筛选，对其蛋白酶的分离提取能够更加深入地了解其功能及作用机制，为其实际应用和工业化生产微生态制剂打下良好的基础。

5. 研究计划与进展

5 研究计划及预期进展5.1 研究计划第一阶段（2015年10月-2015年11月）查阅文献查阅查阅相关图书、杂志、期刊了解乳酸菌的生理学特性及其应用，蛋白酶的研究概况，为正式实验打下基础。

第二阶段（2016年1月-2016年3月）菌种筛选。

通过sds-page电泳从已有的300多个乳酸菌菌种中筛选出蛋白酶活性强的。