屎肠球菌实时代谢产物对单增李斯特菌的抑制机理研究开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

1.1 研究意义在目前的食品生产的过程中，食品可能在各个环节中被单增李斯特菌所感染。

而乳酸菌作为一种天然生物保护菌广泛的应用于食品行业中。

现在大部分实验都是关于乳酸菌对单增李斯特菌致死效果，从数量方面得出结果然后得出该菌种抑菌效果。

2. 研究的基本内容和问题

2.1 研究目标通过单增李斯特菌与屎肠球菌b1共培养，来研究屎肠球菌b1对单增李斯特菌的抑制机理，为工业上应用的可能性提供理论依据。

2.2 研究内容利用膜分离将屎肠球菌b1和单增李斯特菌共培养，每隔一段时间对单增李斯特菌进行取样，通过涂布，扫描电镜和透射电镜，流式细胞术和测定菌体导电性四个方面得出单增李斯特菌的生长曲线，形态结构，存活情况和细胞的完整性来研究抑制机理。

2.3 拟解决的关键问题通过对两种菌的共培养，测定不同时间段的指标来研究屎肠球菌b1对单增李斯特菌的生长的抑制，观察单增李斯特菌菌体的完整性和单增李斯特菌的存活情况。

3. 研究的方法与方案

3.1 研究方法及实验方案3.1.1 菌体活化将屎肠球菌b1和单增李斯特菌分别接种到mrs broth肉汤培养基和bhi液体培养基中，37℃条件下培养15 h；取活化第一次的菌液，按照2%的比例接入新鲜的mrs broth、bhi液体培养基中，37℃下振荡4 h，得到活化菌体备用。

3.1.2 搭建装置本实验使用一款膜隔离培养体系。

将处于稳定期的8 log cfu/ml乳酸菌培养在截留分子量为1000 kd的即用型透析装置中，使用浮标使透析装置悬浮于培养了7 log cfu/ml lm的透析容器中。

4. 研究创新点

本实验使用一款膜隔离培养体系，将处于稳定期的8 log cfu/ml乳酸菌培养在截留分子量为1000 kd的即用型透析装置中，使用浮标使透析装置悬浮于培养了7 log cfu/ml lm的透析容器中。

在透析容器中放入灭菌过的磁力转子，将透析容器放在磁力搅拌器上，调整搅拌速度使其形成涡流。

装置的目的在于使乳酸菌实时代谢产物在实验中实时透过膜，进入lm培养液，而两种菌不能有直接的细胞接触。

5. 研究计划与进展

2017.7 - 2017.9:阅读文献，搜集材料，为实验积攒必要的专业知识和实验材料的储备，进行初步的预实验，获取初期的实验结果。

2017.9 - 2017.10: 进行预实验，熟悉整个实验流程步骤，优化实验步骤，减少实验中可能出现的错误，为正式实验打下基础；2018.3 - 2018.4: 进行正式实验；2018.4 - 2018.5: 整理结果，进行结果分析，撰写论文。