定点突变提高γ-谷氨酰转肽酶的pH耐受性及催化活性开题报告

1. 研究目的与意义（文献综述包含参考文献）

文 献 综 述1. γ-谷氨酰转肽酶的简介γ-谷氨酰转肽酶 (γ-glutamyltranspeptidas,eγ-gtp, e2.3.2.2),又称γ-谷氨酰转移酶,在生物体内广泛存在,是谷胱甘肽(gsh)代谢的关键酶之一,参与谷胱甘肽 环和氨基酸跨膜转运的异二聚体酶, 它能专一性地催化γ-谷氨酰基的转移,具有转肽、自转肽、水解3种催化作用。

起先,人们在 gsh代谢中研究γ-gtp所起的作用,随着研究的深入,人们对 gtp的催化功能和分子结构有了更多的了解,利用其对谷氨酰基的催化水解和转肽特性可以催化合成多种γ-谷氨酰化合物,如谷胱甘肽、谷胱二肽和茶氨酸等。

[1]该反应包括了酶的酰基化(acylation)和脱酰基化(deacylation)两个步骤。

2. 研究的基本内容、问题解决措施及方案

谷氨酰胺转肽酶的热失活是限制酶制剂工业生产和应用的重要因素，如何提高酶在工业环境下的稳定性是近年来生物化工领域研究的热点。

本实验主要用于研究利用PCR定点诱变技术对γ-谷氨酰转肽酶进行定点突变，以改变其内部结构，将亲水基团变为疏水基团，提高疏水键的数目，从而有助于研究突变后酶的稳定性，如耐热性，耐碱性等等，以提高产物的得率，才能为进一步扩展谷氨酰基化反应的产业化应用奠定良好的基础。