组合突变酶GGT的分离纯化和其热力学性质研究开题报告

 2021-08-14 18:05:46

1. 研究目的与意义(文献综述包含参考文献)

γ-谷氨酰转肽酶(γ-glutamyltranspeptidase,ggt,ec 2.3.2.2)又称γ谷氨酰转移酶,在生物体内广泛存在,是谷胱甘肽(gsh)代谢的关键酶之一,并参与了氨基酸的跨膜转运,可特异性催化γ谷氨酰基的转移反应[1]。

人们对ggt的早期研究局限于该酶在gsh代谢中所起的作用[2]。

随着研究的深入,人们对ggt的催化功能和分子结构有了更多的了解,并发现其在临床上可作为肝胆疾病的生物标志,被广泛应用于肝病及其他脏器疾病的诊断和预后检测[3-4]。

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2. 研究的基本内容、问题解决措施及方案

一、研究内容对突变菌株发酵,优化其诱导条件及其发酵条件,提取突变酶,分析构建其分离纯化方法,并用sds-page(sds-聚丙酰胺凝胶电泳)验证所得酶是否已经达到电泳纯,对所得纯酶进行脱盐和浓缩,对纯酶进行一系列的热力学性质研究,分析其与野生型酶的热力学性质差别。

二、 研究目标在现今已经具有突变菌株的情况下,研究找到其最佳诱导条件及其发酵表达条件,进行一系列的分离纯化步骤后,研究其与野生型酶的热力学性质差别。

三、拟解决的关键科学问题1.突变菌株发酵条件的优化方法。

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