产β-半乳糖苷酶重组菌株发酵条件优化开题报告

全文总字数：535字

1. 研究目的与意义

培养生产β-半乳糖苷酶的大肠杆菌，通过改变各种培养条件，寻找更好的培养条件以提高发酵产酶的效率，降低生产β-半乳糖苷酶的成本。

2. 国内外研究现状分析

自1969 年哈佛大学Beckwith研究小组通过利用DNA杂交技术，第一次分离得到大肠杆菌β-半乳糖苷酶基因（lacZ 基因）以来，国外学者对不同来源的β-半乳糖苷酶在不同宿主的克隆表达、酶学性质、固定化、催化机理等做了大量研究.

目前国内对β-半乳糖苷酶的研究主要集中在具有较高的低聚半乳糖转化率的种类以及将β-半乳糖苷酶固定化生产的实验上。2006年江南大学的郑璞等成功研究出β-半乳糖苷酶的固定化将固定化的酶用于低聚半乳糖生产。

3. 研究的基本内容与计划

2017.3.01-2017.3.15准备实验材料和菌种的活化

2017.3.16-2017.4.30开始改变各种条件进行培养

2017.5 开始编辑论文

4. 研究创新点

使用oNPG为底物测量酶活力，水解生成的oNP呈黄色，因此不需要染色剂而是以测量oNP的浓度来计算酶的活力值。

每改变一次培养条件，通过测量得到最高值，将最高的条件应用在下一次改变其他条件的培养中，最终直接得到所有最好条件时的酶活。