毒力因子MakA对霍乱弧菌在宿主体内定殖影响的探究开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

1、 本课题意义：

霍乱弧菌(vibrio cholerae)是革兰氏阴性菌，菌体短小呈逗点状，有单鞭毛、菌毛，部分有荚膜。霍乱弧菌是人类霍乱的病原微生物,霍乱是一种古老且流行广泛的烈性肠道传染病之一。曾在世界上引起多次大流行，主要表现为剧烈的呕吐，腹泻，失水，死亡率甚高。属于国际检疫传染病。

细胞因子(cytokine，ck)是由多种组织细胞(主要为免疫细胞)所合成和分泌的小分子多肽或糖蛋白。细胞因子能介导细胞间的相互作用，具有多种生物学功能，如调节细胞生长、分化成熟、功能维持、调节免疫应答、参与炎症反应、创伤愈合和肿瘤消长等。细胞因子可被分为白细胞介素、干扰素、肿瘤坏死因子超家族、集落刺激因子、趋化因子、生长因子等。众多细胞因子在体内通过旁分泌、自分泌或内分泌等方式发挥作用，具有多效性、重叠性、拮抗性、协同性等多种生理特性，形成了十分复杂的细胞因子调节网络，参与人体多种重要的生理功能。

2. 研究的基本内容和问题

1、研究目标：

通过测定霍乱弧菌入侵宿主后宿主组织细胞三种细胞因子（il1beta、il18以及tnfalpha）水平的差异，探究目的基因对于霍乱弧菌入侵宿主后定植的影响。

2、研究内容：

3. 研究的方法与方案

1、研究方法

研究方法主要包括基因敲除（knockout），酶联免疫吸附试验（enzyme linkedimmunosorbent assay;elisa）。

（1）基因敲除

4. 研究创新点

特色或创新之处

现有的测定vibrio cholera的感染模型一般为构建各个细胞系后进行体外实验测定细胞因子变化。而通过vibrio cholerae感染小鼠后构建感染动物模型，测定小鼠体内细胞因子的研究较少。本实验将通过构建感染动物模型探究霍乱弧菌感染小鼠后宿主体IL1beta、IL18以及TNFalpha三种细胞因子的水平变化来反映霍乱弧菌在宿主体内定植能力的强弱。

5. 研究计划与进展

研究计划及预期进展

2020.03-2020.04

在家阅读相关文献，进一步熟悉课题和实验方法，设计实验。