探讨酿酒酵母中磷脂酶D是否在细胞自噬中具有功能开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

1 研究意义

磷脂酶d(lpd)是一种重要的磷脂水解酶，它广泛分布于植物、动物和微生物中。lpd全称为磷脂酰胆碱磷脂水解酶，它可将磷脂酰胆碱水解为胆碱和磷脂酸。在多种生命过程中如：细胞信号转导、脂降解、膜运输及降解中起重要作用^[1]。当前，有关lpd的研究主要集中在植物细胞中，在微生物中的研究相对较少。

细胞自噬是细胞在自噬相关基因(autophagy-related gene，atg)的调控下利用溶酶体或液泡降解自身受损的细胞器和大分子的过程。该过程还受到一些参与囊泡运输和磷脂代谢的基因的调控。磷脂酰乙醇胺(pe)是自噬体双层膜结构的必要组成成分，因此，磷脂类物质的合成与降解对细胞自噬功能的发挥起了重要作用。本研究拟探究酿酒酵母中磷脂酶d的同源基因spo14缺失对细胞自噬的影响，以进一步深入了解磷完善细胞自噬调控的分子机制提供实验依据。

2. 研究的基本内容和问题

3、研究方案

3．1 研究目标

本研究在验证spo14缺失对减数分裂四分体出芽影响的基础上，探讨spo14及其相关蛋白是否影响细胞自噬过程中磷脂与自噬蛋白的偶联并参与细胞自噬。

3. 研究的方法与方案

3．4 研究方法

3. 4. 1 酵母基因组dna的提取

实验步骤如下：

4. 研究创新点

4、创新之处

由植物中研究较多的LPD联系到微生物中的同源基因SPO14。从LPD的基本功能出发，推测Spo14及其相关蛋白是否影响细胞自噬过程中磷脂与自噬蛋白的偶联参与细胞自噬。

5. 研究计划与进展

5、研究计划

前期：在gfp-atg8标记的相关菌中敲除spo14,检测自噬是否被影响。若有影响，则继续检测atg8的降解情况。

中期：获得二倍体突变菌株，检测其自噬及四分体出芽情况。