基于蛋白质组学的云南白药治疗溃疡性结肠的潜在机理的研究开题报告

 2022-01-22 23:20:28

1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)

1.1研究意义溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,uc)是一种慢性非特异性结肠炎,其病变主要涉及直结肠粘膜与粘膜下炎症,以溃疡、腹痛、腹泻、大便带粘液或脓血为主要特征。

uc病程长,且常伴随肢体关节、眼结膜、口腔、皮肤等并发症,严重影响患者的身体健康及生活质量。

由于治疗缺乏特异性措施,病情易反复发作,尚不能根治,且有癌变风险[1],世界卫生组织把uc作为现代难治病之一。

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2. 研究的基本内容和问题

2.1项目研究的目标、内容和拟解决的关键问题2.1.1 研究目标① 建立结肠组织uc疾病状态,云南白药给药状态下差异表达的蛋白质组数据库,阐明云南白药治疗uc的靶点相关蛋白2.1.2 研究内容① 云南白药体外化学物质组的构建及定性定量研究运用不同比例的醇/水混合溶剂对云南白药进行提取,采用液质联用的方法对云南白药的不同提取部位进行成分定性和相对定量分析。

② 在整体动物水平上研究云南白药治疗uc的靶点相关蛋白运用tnbs诱导大鼠uc模型,以疾病活动为指标,评判云南白药不同提取部位的治疗uc药效。

分离结肠病变组织,提取总蛋白,运用同位素相对标记与绝对定量技术(itraq)分析差异蛋白质组,结合生物信息学分析,发现云南白药治疗uc的靶点相关蛋白,并用western blot验证靶点相关蛋白的表达趋势。

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3. 研究的方法与方案

2.2 拟采取的研究方法、技术路线、实验方案及可行性分析2.2.1研究方法及实验方案云南白药不同提取部位的制备:精密称取100g云南白药原药粉末(云南白药集团提供,批号20080804c),分别用不同体积分数的乙醇/水(95%,70%,50%,30%,15%乙醇和100%水)提取。

运用lc-ms对云南白药不同提取部位进行多组分定性定量分析。

tnbs诱导的大鼠uc模型,提取结肠粘膜组织蛋白并进行western blot验证模型,给予云南白药进行药效评价。

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4. 研究创新点

2.3 本项目的创新之处① 以药物治疗UC的靶点相关蛋白为导向,运用蛋白质组学技术,建立了快速筛选云南白药治疗UC物质基础的方法,丰富了中药物质基础研究的方法学,鉴定出的药效活性成分有利于传统中药品种的二次开发。

5. 研究计划与进展

2.4项目研究计划及预期进展① 2017年11月至2018年3月:完成云南白药体外化学物质组的构建及定性定量研究,建立tnbs诱导的大鼠uc模型,测定云南白药灌肠给药的药效指标。

② 2018年4月至2018年5月:完成云南白药治疗uc大鼠模型的itraq蛋白质组学研究,找到相关靶点蛋白。

2.5预期研究成果① 发现5-10种云南白药治疗uc的相关靶点蛋白。

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