1. 研究目的与意义
研究目的:获得杂交鹅掌楸的MAPK基因全长,了解MAPK基因的结构特点。
研究意义:促分裂原活化蛋白激酶(MAPK) ,又称为细胞外信号调节蛋白激酶(ERK) ,是普遍存在于真核生物中的一类保守的丝氨酸/苏氨酸类蛋白激酶。MAPK参与激素、环境胁迫、细胞分化等有关的信号传递,在木本植物中关于MAPK的研究还很少,了解木本植物中MAPK基因的结构及表达,将有助于了解木本植物的生长发育及抗性研究。
2. 国内外研究现状分析
MAP 激酶级联途径广泛存在于各种植物中, 目前研究比较多的植物主要包括拟南芥、烟草、紫花苜蓿、番茄以及水稻等。目前已经克隆得到的植物MAPK 激酶基因主要有拟南芥的MKK1、MKK2-5, 苜蓿中的SIMKK、PRKK, 番茄中LeMEK1, 烟草中的Nt-MEK1-2、SIPKK, 玉米中的ZmMEK1。
目前克隆得到的绝大多数植物MAP 激酶与哺乳动物MAP 激酶ERK 家族有较高的同源性. 它们的共同特点是催化区域都包含有11 个保守的亚区, 这些亚区是丝氨酸/ 苏氨酸蛋白激酶催化功能所必需. 在催化区域以外的N 端和C 端同源性较低, 但是这些序列同样具有重要的生物学功能, 预示着不同的植物MAP 激酶可以识别不同的底物.
3. 研究的基本内容与计划
研究内容:分析mapk蛋白unigene序列,设计引物进行pcr和race反应,获得基因全长,并构建植物表达载体。
方案制定:本研究拟以鹅掌楸为材料,分析mapk蛋白unigene序列,利用杂交鹅掌楸rna材料,设计引物进行pcr和race反应,获得基因全长,并构建植物表达载体,准备转化拟南芥进行功能验证。
实验数据收集与处理:获得杂交鹅掌楸的mapk基因全长,学会使用简单的生物信息学工具分析基因结构,了解mapk基因的结构特点,构建植物表达载体并进行保存。
4. 研究创新点
map 激酶级联途径广泛存在于各种植物中, 目前研究比较多的植物主要包括拟南芥、烟草、紫花苜蓿、番茄以及水稻等。
杂交鹅掌楸mapk蛋白功能的研究还不是很多,所以该研究比较创新。
以鹅掌楸为材料,分析mapk蛋白unigene序列,获得基因全长,分析鹅掌楸来源的mapk基因的功能。
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