基于小鼠脚掌炎症模型的Immunegulin HA的功能研究开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

1 本课题研究意义

1．1 小鼠炎症模型的建立

1.1.1 造模原理

2. 研究的基本内容和问题

研究目标：

本课题拟于在弗氏完全佐剂诱导性炎症小鼠模型上，观察注射不同浓度的免疫抑制肽或不注射时小鼠脚掌炎症反应的变化；以小鼠足垫的厚度为主要指标，观察ha处理对小鼠足垫红、肿、热、痛的影响；观察ha治疗对小鼠脚掌病理切片的影响，如炎性细胞浸润等，评价ha的抗炎疗效，探寻其免疫学机制,为探索炎性病新的治疗药物提供理论基础。

研究内容：

3. 研究的方法与方案

研究方案：

1.小鼠脚掌炎症模型的构建.

除正常对照组注射20微升生理盐水，其余小鼠在后足跖皮下注射等量弗氏完全佐剂致炎，记录造模成功率。免疫后第 1 天隔日对小鼠进行炎症指数评分：①脚部关节无红肿为 0 分； ②脚趾轻微红肿为 1 分；③脚部及脚趾关节中度红肿为 2 分；④整个脚部红肿并伴随炎症为 3 分；⑤整个脚部红肿、炎症及脚趾关节变形为 4 分。 各肢体得分相加为该小鼠关节炎总评分。

4. 研究创新点

大量研究表明，从一些吸血节肢动物如蜱虫的唾液腺中分离纯化得到的天然生物活性物质，比如具有免疫调节活性的肽类物质，有较高的清除自由基的活性和抗氧化能力。免疫调节肽通过直接抑制宿主炎症因子的分泌，如TNF-α、IFN-γ、IL-1或间接地增加免疫抑制因子的分泌，如IL-10等来抵御宿主的免疫排斥。而以前往往缺乏一种高效统一的建模方式，通过此研究,本课题将根据HA的特性开发一种更新换代的建模方式。

本课题组研究HA已经有好几年了，对于其理化特性十分了解，而且一直根据实际要求对其结构等进行改造。结合动物模型，我们还能找出HA在日后在生产当中可能面临的缺点，因为实际上体外合成的多肽不可能和生物体内产生的免疫抑制肽发挥一模一样的作用，但通过动物模型，我们可以尽可能发现共同点，它最大程度的代表了免疫抑制肽在机体起作用的过程。相比分子和细胞水平的研究，个体水平更有说服力，也更能展示整个机体对外界的反应，大致可以模拟人类会出现的反应，为日后上临床研究打下基石。

5. 研究计划与进展

研究计划：

2017.2-2017.3： ha的体外合成。准备实验器材、试剂以及小鼠。

2017.3-2017.4：进行预实验，确定ha溶液的适宜浓度。对注射、测量数据、记录数据的方法进行规范化操作。