漆酶参与加拿大一枝黄花入侵机制的初步探究开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

1.研究意义：加拿大一枝黄花(solidago canadensis l.)为原产于北美的菊科(asteraceae) 一枝黄花属( solidago l. )多年生草本植物。

于1935年作为观赏花卉引种入我国的上海、南京等地区，20世纪80年代时逸生于野外并迅速扩散蔓延成恶性杂草，现已分布于我国多个地区，并且还有可能继续扩散[1]。

入侵地的本地物种、蔬林果园与旱田作物因为加拿大一枝黄花的入侵而严重影响。

2. 研究的基本内容和问题

1.研究目标：通过模拟天敌侵染实验，研究加拿大一枝黄花入侵地种群与原产地种群抵御外界侵袭能力的区别，并尝试将这种抵御能力量化。

2.研究内容：模拟天敌侵染实验：利用齐整小核菌菌株sc64模拟天敌侵染加拿大一枝黄花入侵地和原产地种群的茎秆，再通过菌斑数量大小等指标考察天敌侵染程度及植株受害情况差异。

木质素代谢过程中相关酶表达水平差异的研究：本实验室之前利用双向凝胶电泳结合western blot杂交检测技术检测木质素代谢相关酶蛋白表达水平的差异。

3. 研究的方法与方案

1.研究方法：模拟天敌侵染实验种群防御天敌能力研究：本实验中我们利用从加拿大一枝黄花罹病植株上分离得到的强致病性菌株齐整小核菌菌株sc64模拟天敌对加拿大一枝黄花的侵染，考察天敌侵染方式及植株受害情况。

齐整小核菌菌丝体的制备：将齐整小核菌菌株sc64接种在pda培养基中于28度培养3-5天，该培养基中含有土豆、蔗糖、琼脂。

将液体培养基pdb（该培养基包括土豆，蔗糖）常规高压蒸汽灭菌25min，接种活化的齐整小核菌菌饼10枚，28℃下，120rpm培养5d，高速离心机9000rpm离心18min，倾倒上清，将沉淀配置成一定浓度的菌液待用。

4. 研究创新点

本实验通过模拟天敌侵染实验模拟自然条件下天敌侵染加拿大一枝黄花的过程，实验过程中使用活体植株而不是离体组织。

并试图将加拿大一枝黄花抵御侵袭能力量化以了解加拿大一枝黄花入侵过程中对外界侵袭抵御能力的变化，借此进一步明确加拿大一枝黄花的入侵机理。

5. 研究计划与进展

2015年09月~2015年10月实验进度安排，学习相关仪器的操作与相关实验操作流程 。

2015年11月~2015年12月采集相关种群的材料并进行相应的处理以准备下一步实验。

2016年02月~2016年03月进行模拟天敌侵染实验。