TOR蛋白对于灵芝生长及三萜合成的影响开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

本课题的意义、国内外研究概况、应用前景等（列出主要参考文献）1.本课题研究意义1.1 tor蛋白的概述tor蛋白（the target of rapamycin），又称雷帕霉素靶蛋白，是保守的ser / thr激酶，其通过环境信号来调节细胞生长和代谢。

根据有关研究，在哺乳动物tor复合体和他们调解的信号分支中，tor是两种不同的多蛋白复合物的一部分，tor复合物1（torc1），其对雷帕霉素敏感，而torc2不是[1]。

哺乳动物torc1失调的生理学结果表明，哺乳动物tor的抑制剂可用于治疗癌症，心血管疾病，自身免疫和代谢疾病。

2. 研究的基本内容和问题

研究的目标、内容和拟解决的关键问题1. 研究目标研究灵芝tor对于灵芝生长，菌丝分叉，次级代谢产物灵芝三萜的合成影响，以及检测参与其中调控的ca2 的作用。

2. 研究内容2.1 tor基因rnai沉默实验1) 采用实验室已经获得的灵芝沉默突变体，检测其生长；2) tor沉默对于菌丝分叉的影响；3) tor沉默对于灵芝三萜合成影响；4) tor沉默对于胞内ca2 的变化影响。

2.2 tor抑制剂雷帕霉素相关实验为了检测雷帕霉素处理是否与tor沉默导致的结果类似，我们检测雷帕霉素处理对于灵芝生长的影响，进行以下相关实验。

3. 研究的方法与方案

研究方法、技术路线、实验方案及可行性分析1.1菌株、质粒、试剂及菌株培养1.1.1菌株、质粒、试剂灵芝（g. lucidum）菌株g20由上海农科院提供。

溶壁酶购自广东省微生物研究所、taq dna polymerase、限制酶、t4 dna ligase购自大连takara公司。

所用到的抗生素均购自上海生工生物工程公司，其它试剂均为分析纯。

4. 研究创新点

特色或创新之处目前关于TOR蛋白的研究主要集中于哺乳动物方面，但关于大型担子菌中TOR蛋白的研究在国内外还少有报道。

本课题以研究灵芝中TOR蛋白对灵芝生长及三萜合成的影响为目的，为研究TOR蛋白在大型担子菌中的作用提供数据。

5. 研究计划与进展

研究计划及预期进展2016.09-2016.10熟悉实验室基本情况，查阅相关文献；2016.10-2016.11查阅相关文献，向师兄师姐学习基本实验操作，做一些预实验，进行实验条件的摸索；2016.11-2017.03培养灵芝g20菌株的野生型，培养tor基因rnai沉默菌株以及对灵芝g20菌株做雷帕霉素处理。

2017.03-2017.04测定各项生理指标，研究tor基因沉默后以及施加雷帕霉素处理对三萜合成，胞内ca2 离子及菌丝分叉的影响。

2017.04-2017.05整理实验数据，撰写毕业论文，准备答辩。