吡嘧磺隆对土壤微生物多样性的影响开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

一、研究意义吡嘧磺隆属于磺酰脲类的除草剂[1]，其原理是通过抑制植物体内的乙酰乳酸合成酶（acetolactate syrnthase,als）[2-3]的活性，从而抑制细胞有丝分裂，阻碍支链氨基酸的合成，使阔叶科和莎草科杂草难以生长，起到除草的作用。

吡嘧磺隆是我国水稻田用量最大的除草剂之一[4-5]。

吡嘧磺隆保证了农作物丰产丰收、促进了农业生产的发展，因而在水稻种植中得到广泛而长期的使用。

2. 研究的基本内容和问题

研究的目标、内容和拟解决的关键问题一、研究目标1.模拟培养水稻，在不同浓度的吡嘧磺隆用稀释涂布平板计数板法检测出水稻根系土壤和水中细菌、真菌和放线菌的变化；2.测出土壤和水中铵态氮和硝态氮的含量因吡嘧磺隆浓度产生的变化，即吡嘧磺隆对土壤营养的变化；3.对土壤微生物总dna进行高通量测序。

二、研究内容1.不同浓度吡嘧磺隆处理下，稻田土壤中细菌、真菌以及放线菌数量的变化特征；由于土壤成分的不同，各个地区土壤微生物不同，对吡嘧磺隆的反应也不同，选取禄口区未经磺酰脲类除草剂污染过的土壤，在不同浓度的吡嘧磺隆处理下，对土壤采样稀释涂布，于细菌、真菌和放线菌培养基中培养并计数，得出变化。

2.不同浓度吡嘧磺隆处理下，稻田土壤中铵态氮、硝态氮和水体铵态氮、硝态氮含量的变化；土壤和水中氮素的变化是微生物多样性变化最直观的反应，土壤和水中微生物越活跃，氮素循环越快，生态越稳定，土壤肥力越强。

3. 研究的方法与方案

一、研究方法（一）稀释涂布法稀释涂布平板法是常规的用来初步测定某一区域微生物数量的方法[1]。

不同的培养基可以培养不同类的微生物。

稀释涂布法是将菌液梯度稀释到合适的浓度，涂布到特定固体培养基表面进行培养[2-3]。

4. 研究创新点

特色或创新之处1. 选取南京市禄口区未经磺酰脲类除草剂污染的稻田土壤为试验对象，该对象研究数据较少，而对吡嘧磺隆对微生物多样性影响的数据缺乏。

2. 本试验使用盆栽模拟稻田土壤环境培育水稻，节省了实验环境，降低了实验操作难度，但严格控制模拟稻田生态。

3. 将稀释涂布平板计数法、铵态氮和硝态氮的测定和高通量测序联合探究，并多次测量平行对照，增强了数据的可靠性。

5. 研究计划与进展

一、 研究计划2017.09-2017.11 课题申报以及文献查阅；2017.11-2018.02 文献综述撰写、土壤微生物的平板计数；2017.2-2017.3 土壤及水样的铵态氮和硝态氮的检测、DNA高通量测序；2017.4-2018.5 数据分析以及论文撰写。

二、预期进展1.得出不同浓度吡嘧磺隆处理下，细菌、真菌和放线菌多样性的变化；2.得出吡嘧磺隆对土壤微生物多样性影响的数据比较；3.得出禄口区稻田施用吡嘧磺隆最适用量； 4.熟练掌握氮素检测方法，DNA测序等分子生物学技术。