多壁碳纳米管提高油菜耐盐性分子机制的初探开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

一、研究意义植物在自然环境下常常受到各种环境因子的胁迫。

盐胁迫是最常见的环境胁迫之一。

盐胁迫对植物影响十分显著，会引起细胞渗透压的改变，打破植物细胞内离子的平衡，以及产生ros，导致氧化损伤。

2. 研究的基本内容和问题

研究的目标、内容和拟解决的关键问题一、研究的目标与内容1.多壁碳纳米管有促进和抑制作用，研究多壁碳纳米管对盐胁迫下油菜的影响，及产生这种现象的机制a.测处理后油菜MDA含量变化；b.测钠钾离子含量变化：ICP法；c.了解不同处理后活性氧在油菜内部的分布：化学染色法观察；d.测抗氧化酶基因的表达量采用荧光定量PCR法2.主要研究其和一氧化氮的关系，多壁碳纳米管通过调节一氧化氮含量来重建内部氧化还原稳态和离子稳态，从而缓解盐胁迫对油菜生长的抑制a.观察NO在油菜中的含量变化：采用荧光探针染色后激光共聚焦显微镜观察的方法；b.采用Griess试剂法测定NO在油菜中的含量变化；二、拟解决的关键问题首先多壁碳纳米管可以缓解盐胁迫对植物生长的抑制，但其作用机制还不明确，一氧化氮作为一种重要的气体信号分子，在植物抗逆过程中具有重要的作用，本文主要研究多壁碳纳米管缓解盐害对植物生长的抑制是通过调节一氧化氮的含量来发挥作用的。

3. 研究的方法与方案

一、研究方法1.用电子显微镜观察多壁碳纳米管在油菜细胞内部分布（蕈卫玲，2011）2.观测多壁碳纳米管内部的含量采用荧光显微镜观察的方法（蕈卫玲，2011）3.观察no在油菜中的含量变化：采用荧光探针染色后激光共聚焦显微镜观察的方法4.采用griess试剂法（杨文萍等，2002）测定no在油菜中的含量变化5.了解不同处理后活性氧在油菜内部的分布：化学染色法（林金明等，2002）观察6.测抗氧化酶基因的表达量采用荧光定量pcr法（杨立桃等，2005）7.用化学法（林金明等，2002）测定抗氧化酶活性变化8.测处理后油菜mda含量变化：比色法（张莉等，2006） 9.用荧光定量pcr法（杨立桃等，2005）测钠钾离子通道蛋白基因的表达量10.测钠钾离子含量变化：icp法（张晓海，2006）二、技术路线盐胁迫和多壁碳纳米管引起植物体内源no含量的变化，进而引起下游信号分子的变化，从而起到缓解盐胁迫的作用。

三、实验方案1.多壁碳纳米管和盐浓度的筛选；2.con， nacl， mwcnt， mwcnt nacl处理1-7天内源no含量变化及表型变化筛选出最佳实验条件；3.no清除剂ptio，snp，nacl和mwcnt组合处理表型变化。

；4.电镜观察油菜根部以及地上部mwcnt分布，荧光染色观察其含量；5.组合处理下过no含量变化（化学法，激光共聚焦）；6.dab、nbt染色观察h2o2含量及分布变化；7.mda含量变化；8.抗氧化酶活性及基因表达量变化；9.na ，k 含量变化及相关基因表达量变化；遗传学突变体材料对实验结果验证。

4. 研究创新点

证明了多壁碳纳米管是通过调节一氧化氮含量来调节氧化还原稳态和离子稳态来缓解盐胁迫，为油菜抵御盐胁迫提供了新型的材料。

5. 研究计划与进展

一、研究计划起止时间 工作内容 阶段成果2016.9-2016.1 查阅相关文献，课题的资料收集与整理，确定研究初步方案； 文献综述2016.2-2017.4 进行室内试验，进行各项生理指标的测定，并整理实验数据； 开题报告试验记录2017.5 撰写毕业论文，准备答辩 毕业论文二、预期进展明确多壁碳纳米管对于缓解油菜幼苗盐胁迫有影响，解决多壁碳纳米管在油菜内作用的部分机制。