1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）
1本课题研究意义在拟南芥中des1基因是唯一一个被鉴定出位于细胞质而且能够编码l型半胱氨酸脱巯基酶(l-cysteine desulfhydrase, lcd)[1]的基因，半胱氨酸脱巯基酶是催化l-半胱氨酸脱硫化氢和氨产生丙酮酸反应的酶。
对于h2s在动物方面的研究已经成为热点领域。
近年来，对于h2s在植物方面的研究虽然较少，但已经取得了较大进展，在植物体内，h2s可以通过半胱氨酸脱巯基酶分解出h2s、丙酮酸盐和nh3。
2. 研究的基本内容和问题
1研究目标本课题构建在abi4突变体中气孔特异性表达硫化氢的材料，进而筛选出能够回补硫化氢的材料。
2研究内容本课题通过构建pmyb60-des-1304载体，然后将载体转入农杆菌中，用农杆菌去利用农杆菌蘸花法侵染拟南芥，通过在潮霉素抗性板子上筛选出能够回补h2s的材料。
获得突变体转基因植株。
3. 研究的方法与方案
1研究方法提取叶片dna；pcr验证；琼脂糖凝胶电泳；农杆菌转化；农杆菌蘸花法侵染拟南芥2技术路线将构建的载体转入农杆菌→农杆菌蘸花法侵染拟南芥→潮霉素抗性筛选→提取叶片dna→pcr验证→根据条带鉴定筛选出突变体3实验方案3.1 农杆菌转化1. 取80℃保存的农杆菌感受态于室温或手心片刻待其部分融化，处于冰水混合状态时插入冰中。
2. 每100微升感受态加入0.01-1μg质粒dna（转化效率较高，第一次使用最好做预实验，确定所加质粒的量）用手拨打管底混匀，依次于冰上静置5分钟，液氮5分钟，37℃水浴5分钟，冰浴5分钟。
3. 加入700μl无抗生素的lb或yeb液体培养基，于28℃震荡培养2-3小时。
4. 研究创新点
近年来关于h2s的研究越来越多，但关于abi4和h2s两者是否能起到协同作用促进植物各方面生理功能的增强以及研究两者协同作用的机制这些方面的研究并不完善。
本课题通过构建pmyb60-des-1304载体，然后将载体转入农杆菌中，用农杆菌去侵染拟南芥，获得突变体，筛选出能够回补h2s的材料。
为进一步研究abi4和h2s奠定基础。
5. 研究计划与进展
2017.09至2017.10 农杆菌转化→浸种→点种→种苗2017.10至2017.11 提取叶片DNA、PCR扩增目的基因、琼脂糖凝胶电泳鉴定突变体、筛选突变体2017.12至2018.01 对二代种子进行鉴定和筛选2018.03至2018.04 对三代种子进行鉴定和筛选
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