东台杨树人工林土壤真菌的分离研究开题报告

全文总字数：4301字

1. 研究目的与意义

本研究通过采集东台人工林土壤样本，并从土壤样品中分离真菌微生物，观察菌株表型（不同培养基培养以及电镜观察），对分离的真菌提取基因组，进行PCR扩增，然后进行ITS测序，进行菌株鉴定，完成对分离获得的真菌菌株进行分类鉴定后，对其种类和分布进行分析研究，旨在分析了解东台人工林土壤真菌的多样性，为今后功能微生物的筛选分离提供前期工作基础。

2. 国内外研究现状分析

王书珍等人对社鹃花(rhododendroⅡsimsii planch．)根部土壤微生物进行了筛选，依据形态特征和rdna its序列信息，对比临近根部土壤中的真菌，共分离出5种真菌。结果表明。枝孢霉(ephalosporiⅡm sp．)头孢霉(cephalosporiⅡmsp．)、拟盾壳霉(paraconiothyriumhawaiiense)均为与杜鹃花共生的真菌类型。该研究为后续杜鹃花和根际微生物共生机制的研究奠定了基础。董治统等人通过比较红树林、海洋沉积物及北极3种不同生境中可培养真菌的物种多样性、代谢产物多样性及抗菌活性，从中分离、筛选活性代谢产物产生菌。采用稀释涂布平板法分离所采集样品中的真菌，根据形态学特征进行菌株排重，利用抗菌活性模型筛选菌株，利用高效液相色谱检测技术研究其代谢产物多样性。揭示了不同生境中可培养真菌的生态分布特点，为特殊生境真菌资源的开发利用提供了背景资料。王建美等人采用常规分离法从不同地区健康黄栌根系中共分离得到33 株内生真菌, 其优势类群主要包括无孢菌群、腐质霉属、青霉属等, 而且不同地区黄栌的根系内生真菌种类和数量有一定差异。 内生真菌对黄栌枯萎病病原大丽轮枝孢的拮抗试验结果表明:团炭角菌、黑乌霉属、假丝酵母属的菌株抑制作用较强, 其它内生真菌菌株对大丽轮枝孢均有不同程度的抑制作用。

利迪链霉菌 a02 是从京郊森林土壤中分离筛选出的植物病原真菌高效拮抗菌株。隋勤等人为了明确其抑菌活性的物质基础, 利用大孔树脂和硅胶吸附柱层析、 hplc 循环制备分离等方法, 从菌株 a02 发酵液中分离获得了纯度达 99.845%以上的单一组分活性化合物。经紫外光谱、高分辨质谱、红外光谱和核磁共振谱的测定和解析, 确定了该活性化合物的分子量为 665, 分子式为 c33h47no13, 化学结构与四烯大环内酯类抗生素纳他霉素相同。这一结果揭示了利迪链霉菌产生抗真菌天然产物的新功能, 并为纳他霉素在植物病害生物防治中的应用开拓了新的途径。

赵颖茹等人对银杉根际土壤中的真菌进行培养分离, 得到了形态上很相似的两株真菌 f-1和 f-2.在基于形态特征鉴定困难的情况之下, 对真菌 f-1和 f-2的 rdnaits区进行 pcr扩增和测序.真菌 f-1和 f-2 的its序列与来自于 10个属 30个种的不同真菌的 its序列进行序列比较和系统发育分析, 结果表明:真菌 f-1属于木霉属(trichoderma), 真菌 f-2属于被孢霉属 (mortierella).结果表明, 基于分子水平的鉴定方法具有快速、准确、简便、高效等特点, 在真菌鉴定分类研究中起着重要作用.

3. 研究的基本内容与计划

研究内容：本研究课题利用东台杨树人工林土壤样品，分离相关真菌进行分类及特性研究。 为今后功能微生物的筛选分离提供前期工作基础。

研究计划：

1.真菌分离:从土壤样品中分离真菌微生物，观察菌株表型（不同培养基培养以及电镜观察）。

4. 研究创新点

从目前国内外研究来看，大多选择是对自然林或对某种动植物进行真菌分离和分析研究，本课题则选择人工林中杨树为研究分析目标，对人工林的真菌的分布和多样性进行分析，并与自然林的真菌分布和多样性进行比较分析，研究不同土壤真菌分布和多样性对杨树的生长发育有何影响。