小叶杨TMM基因植物表达载体构建开题报告

全文总字数：1404字

1. 研究目的与意义

气孔作为植物与外界进行气体交换的通道，对植物自身的生长发育至关重要。目前已经有大量的研究表明调控气孔发育的各个基因之间相互作用，并与外界环境信号及自身发育程序共同形成了一个复杂的调控网络。

tmm基因编码一个富含亮氨酸重复序列的受体类蛋白（lrr-rlp）。在叶片的气孔发育途径中，tmm基因作为一个正调控因子增加了拟分生组织增殖分裂的次数，能够纠正气孔发育过程中的错误分布模式，而作为负调控因子可以控制邻近细胞间隔分裂的速度，降低产生卫星拟分生组织细胞形成过多气孔的可能性。

小叶杨(populus simonii carr）是改善我国土地状况和发展林业经济的优良树种，具有抗旱、耐瘠薄、适应性广、生长优良、寿命长等特性。

2. 国内外研究现状分析

（文献综述另附页）

气孔是高等陆地植物特有的表皮结构，它是植物与大气相连接的通道，对植物自身的生长发育至关重要。植物气孔发育的过程较复杂，受到转录因子、蛋白激酶及各种功能基因编码的蛋白等因素的协同控制，同时受环境因素的影响。

tmm基因编码一个富含亮氨酸的类受体蛋白（lrr-rlp），蛋白的保守区域是亮氨酸重复序列区域（lrr），是气孔信号传导过程中的重要调节因子，主要是通过抑制响应定位信号的细胞进行不对称分裂来调控分裂方向。

3. 研究的基本内容与计划

1）利用软件，进行tmm基因3端和5端序列进行拼接，获得全长序列；

2）设计克隆tmm基因全长序列引物；

3）提取小叶杨总rna，并进行 rna反转录；

4. 研究创新点

传统表达载体的构建方法必须分别对载体和目的基因进行酶切，然后再进行连接，过程繁杂。本研究采用Gateway技术构建TMM基因的植物表达载体，免去了酶切与连接的麻烦，过程简单快速。

Gateway技术以λ噬菌体位点特异性重组系统(attBattP→attLattR)为基础，两端具有重组位点的目的基因可以非常容易地被重组克隆到含有同源重组位点的载体上，只需要BP和LR两个反应就可以完成相关表达载体的构建。