RNAi抑制基因对杨树瞬时表达效率的影响开题报告

全文总字数：1130字

1. 研究目的与意义

rnai是指在进化过程中高度保守的、由双链rna诱发的、同源mrna高效特异性降解的现象。

基因沉默是rnai的一种技术，主要有转录前水平的基因沉默(tgs)和转录后水平的基因沉默(ptgs)两类。

有时转基因会同时导致tgs和ptgs。

2. 国内外研究现状分析

①Takata N et al, 2012：杂种白杨（Populus tremulaP. tremuloides）简单有效的瞬时转化②Liu et al, 2002：用TRV-VIGS载体来研究本氏烟草中的基因功能③ Voinnet O et al,2012：番茄矮化特异病毒p19蛋白抑制基因沉默的植物瞬时表达系统④Gleba et al：有效使用基于病毒的载体在植物细胞中瞬时表达外源基因⑤Ira Marton et al，2010：TRV可用于植物中的双重外源基因表达、pTRV介导的ZFN表达导致位点特异性突变⑥Ira Marton et al，2010：回复突变的烟草和矮牵牛，通过间接转移ZFNs进入靶组织，病毒载体可成功用于诱导植物的永久性和遗传性突变，并且突变的植物可从现有器官中回收，产生不含病毒和ZFN的突变后代。

⑦Yule Liu et al，2002：用烟草脆裂病毒-病毒诱导基因沉默（TRV-VIGS）载体沉默番茄PDS基因 ⑧孙蔓莉等，2015：农杆菌介导的烟草瞬时表达影响因素研究⑨张大燕，等，2015：农杆菌介导的桑树瞬时表达体系构建及miRn51与其靶基因的表达分析⑩彭绿春,等. 基于GUS基因瞬时表达优化云南杜鹃

3. 研究的基本内容与计划

在本研究中，我们拟定共表达rnai抑制基因，尝试是否其能提高杨树的瞬时表达效率。

实验数据的采集主要包括载体构建过程中的电泳和测序结果，瞬时表达后的gus染色结果，比较分析共表达rnai抑制基因和对照之间的差别。

希望在结论中体现rnai抑制基因是否能提高杨树瞬时表达效率。

4. 研究创新点

通过瞬时表达实现对杨树目的基因的改造,不仅改善了杨树的性状,而且产生的突变可以稳定的遗传到后代,更为重要是产生的突变体植物里没有外源基因的整合,具有较高的生物安全性