1. 研究目的与意义
1.1研究背景
近年来,利用微生物降解羽毛已引起广泛关注。目前已报道的羽毛降解菌主要来源于陆地,本研究对菌株的产酶条件、角蛋白酶异源表达及酶学性质进行研究。
1.2研究目的
2. 研究内容和预期目标
2.1主要研究内容
除了利用羽毛降解菌自身的酶活力外,其他因素如培养基和培养条件也是影响角蛋白酶活性的主要因素,无论是通过单因素、正交还是响应面试验,都可以被用来优化角蛋白酶活性。abdelfattah 等通过单因素试验,研究了b. licheniformis alw1 的产酶条件,得到72.2 u/ml 的最佳酶活性。cai等通过正交试验,优化了 pseudomonas 3096-4 的产酶 条件。gafar 等采用 pb 和响应面试验,设计优化了 bacillus sp. upm-aag1 的产酶条件,优化后的最佳酶活性为 60.55 u/ml。p. aeruginosa gxun-7 分离于海洋环境,由于其自身生长环境及实验室环境的差异,对其产酶条件进行优化是非常有必要的。
2.2内容要求
3. 研究的方法与步骤
3.1菌株产酶条件单因素优化
初始发酵培养基及培养条件为羽毛10 g/l,nacl 5 g/l,k2hpo4 1.4 g/l,kh2po4 0.7 g/l,初始 ph 7.0,35 ℃,200 r/min,接种量 1%,装液量 50/250 ml,发酵 48 h。改变以下单一条件,研究不同因素对菌株产角蛋白酶的影响,每组分别设置3个重复,结果取平均值。发酵结束后,分别测定各发酵液的角蛋白酶活性。
3.2羽毛浓度对菌株产酶的影响
4. 参考文献
[1]gupta r, ramnani p. microbial keratinases and their prospective applications: an overview [j]. applied microbiology and biotechnology, 2006, 70(1): 21-33.
[2]akram f, haq i u, jabbar z. production and characterization of a novel thermo- and detergent stable keratinase from bacillus sp. nksp-7 with perceptible applications in leather processing and laundry industries [j]. international journal of biological macromolecules, 2020, 164: 371-83
[3] sharma i, kango n. production and characterization of keratinase by ochrobactrum intermedium for feather keratin utilization [j].
5. 计划与进度安排
1、第17周(22-23-1学期)-第2周(2024年12月27日--2024年3月6日)接受任务、查阅和翻译文献、撰写及完成开题报告
2、第3周-第4周(2024年3月7日--2024年3月20日)根据实验步骤进行菌种的发酵条件优化进行数据测定、记录
3、第5周(2024年3月21日--2024年3月27 日)收集实验结果,分析数据
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