剪切型hSUMO蛋白的重组质粒构建与表达开题报告

1. 研究目的与意义

背景目的及意义：

随着人类基因组计划的完结，蛋白质结构与功能的关系成为当前生物学研究 的热点。其中，蛋白质的翻译后修饰受到科研人员的广泛关注(如甲基化，磷酸 化，泛素化和类泛素化等)。这些翻译后修饰蛋白在生物体内发挥着重要的生理功能。sumo蛋白是一种类泛素蛋白，它可以通过el，e2，e3三级酶联反应共价 偶联到某些底物蛋白上，形成sumo修饰的目标蛋白，而sumo化蛋白在生物 体内的核质转运、信号传导、dna的损伤修复和蛋白质的降解等过程中发挥着 重要的作用。在sumo化的过程中，sumo蛋白本身也可以被乙酰化或者多聚化，sumo蛋白本身的这种修饰对sumo化蛋白的功能发挥同样具有重要的作用。

2. 研究内容和预期目标

本课题主要研究内容有：

1、sumo基因的确定

2、对于sumo基因进行合成，鉴定及回收

3. 研究的方法与步骤

1、供体菌培养（ lb培养基）和质粒的提取（按照试剂盒步骤操作）

2、琼脂糖凝胶电泳检出质粒

3、目的基因的获取：通过pc合成r获得目的基因，经过高温变性，低温退火，中温延伸3个步骤

4. 参考文献

1.吴乃虎.“琼脂糖凝胶电泳。”遗传工程1（1983）：0.8.

2.张岚岚，徐春燕，and 徐昌杰。“大肠杆菌感受态细胞转化能力的影响因素。”细胞生物学杂志26.4（2004):429-432.

5. 计划与进度安排

（1）2022-2022-1学期17-20周~2022-2022-2学期第1周~第2周（2022-12-25~2022-3-16），查阅资料，目的基因序列的确定，准备开题报告，外文论文翻译； （2）第3周~第6周（2022-3-19~4-13），设计引物、选择合适酶切位点、质粒抽提、细胞培养等实验、初步设计；（3）第7周~第11周（2022-4-16~5-18），目标基因扩增、剪切、载体连接、转化、细胞培养、转化子的检测以及重组子的细胞表达等（4）第12周~第14周（2022-5-21~6-8），整理、撰写论文，完成；一张基因扩增电泳检测图、一张质粒酶切电泳检测图，一张重组子构建检测图以及一张蛋白表达电泳图（5）第15周~第16周（2022-6-11~6-19），提交重组子构建的重组细胞、实验报告、英文翻译、图表等，毕业答辩。