胰岛素产品分离纯化方法的开发开题报告

1. 研究目的与意义

一、课题实施的目的，意义

在现代社会中，因为生活条件的改善，使的一些亚健康出现，也导致一些以前的老年后才会出现的一些疾病在青年群体中开始出现，比方说对人们影响较大的糖尿病，这种疾病对人体影响较大而且极其难以治愈，只能通过体外胰岛素的注射来缓解糖尿病，但是通过皮下注射的胰岛素会使身体逐渐产生抗性，药效发挥较慢，这就促使我们这个a类胰岛素^[1]的开发。

本课题旨在探究如何通过高压纯化工序对低压酶切重组柱浓缩后的所形成的a类胰岛素样品液进行进一步的提纯，去除其中较小颗粒的物体，从而保留蛋白质，并使其最终形成原料。方便为后续的制成成品提供比较纯的蛋白质料液。

2. 研究内容和预期目标

在高压制备a 中，通过酶促反应将苏氨酸与a种胰岛素b29位lys羧基端结合，得到a种胰岛素酯^[2]粗品。其包含的主要杂质有缺eegepk肽段的a种胰岛素原（含量为1.03%）、脱水杂质（含量为5.92%/3.02%）、未酯化的a种胰岛素（含量为6.75%）、糖基化杂质（含量为0.15%/0.22%/0.48% /0.19%/0.56%）等。

为了提高下游水解工艺中水解效率，需将a种胰岛素酯粗品中酯化反应物、断裂片段、结构相近杂质去除，故该步纯化采用具有高分辨率的高压制备液相。

在高压制备b中，通过水解反应将a种胰岛素酯b30位苏氨酸^[3]上的保护基去除，得到a种胰岛素粗品。其包含的杂质主要有糖基化杂质（含量为0.15%）、脱酰胺杂质（含量为1.26%）、异构杂质（含量为1.31%）等。

3. 研究的方法与步骤

四、课题实施的具体计划

1.实施的方法

1.1高压制备a

4. 参考文献

六、参考文献

[1]中华医学会糖尿病学分会.中国2型糖尿病防治指南(2010年版).中国医学前沿杂志.2011,3(6):54-109.

[2] document-who/ncd/ncs/99.2. definition, diagnosis and classification of diabetes mellitus and itscomplications. world health organization. 1999.

5. 计划与进度安排

2.具体实施计划

2.1 2022年12月-2022年1月 完成高压制备a的缓冲液和填料的确定

2.2 2022年2月-2022年3月 完成高压制备b的缓冲液的选择与相关参数的确定