家用消毒剂对蚕豆根尖细胞微核的诱导作用研究开题报告

1. 研究目的与意义

微核是常用的遗传毒理学指标之一，常被用于评价环境诱变因子常常被用于评价环境诱变因子对生物遗传物质的损伤程度，当环境因素诱导染色体发生断裂或细胞分裂过程中染色体发生落后现象时，可导致微核形成，且微核的形成数量与环境的致畸效果密切相关。而当环境因素对于遗传物质有保护作用时，可使试验材料本底微核数降低。

所以，蚕豆微核技术在环境中存在的致遗传突变检测中的应用越来越受关注。蚕豆根尖微核技术自建立以来，以其简单、快速等特点广泛用于对水源、土壤、大气等环境中化学有毒物质和环境污染物的致突变性检测。

近年来，在应用蚕豆微核技术评估一种或几种物质遗传毒性研究方面，出现了许多研究成果。例如，李莹，周细平和邓祥斌做的4种家用洗涤剂对蚕豆根尖细胞微核率的影响实验中，发现洗衣液、洗洁精、沐浴露在浓度0.10%、0.20%和0.30%，洗发水浓度在0.05%、0.10%、0.20%和0.30%都会不同程度的诱导诱导蚕豆根尖微核的产生。刘晨做的集中常用防腐剂的遗传毒性评价试验中，发现苯甲酸钠、山梨酸钾、对羟基苯甲酸乙酯类和脱氢醋酸钠的浓度与微核率之间呈剂量-效应关系，随着浓度增加，微核率也在增加。

伴随着化工业的迅猛发展，各种各样的消毒剂相继问世，随着人们健康意识的增强，这些消毒剂的遗传毒理也正在受着广泛的关注。消毒剂可以杀灭物体表面的细菌和微生物，在医疗卫生、饮水和污水处理等方面都有广泛的应用。然而，随着消毒剂组分越来越复杂，导致对于环境的污染和人体健康问题的影响引起人们高度重视，尤其是消毒剂的致畸作用，为了确保消毒剂的使用安全，本课题计划用蚕豆根尖微核检测技术来对四种家用消毒剂的致突变的遗传独立进行初步研究和探讨。

2. 研究内容和预期目标

主要研究内容：研究四种家用消毒剂（84消毒剂、滴露牌消毒剂、新洁尔灭消毒剂、巴芙牌家居安全杀菌消毒剂）致蚕豆微核效应的影响，比较所得数据，发现代表性家用消毒剂样品遗传毒性的影响强度，从而比较消毒剂间安全程度差异，为家用消毒剂的遗传毒理作用和治理等提供基础性论据。

预期目标：通过显微镜可以观察到四种消毒剂诱变微核的效果，具体来说就是同种浓度的不同消毒剂和同种消毒剂的不同浓度对蚕豆微核效应的不同效果，预期结果是不同浓度下每种消毒剂诱变的微核数都随着消毒剂浓度的增加而增加，同一浓度下不同消毒剂诱变的微核数差异还无法确定，要通过实验进一步得知。

3. 研究的方法与步骤

研究方法：采用蚕豆根尖细胞微核监测技术，分别探讨同一浓度下不同消毒剂对蚕豆根尖细胞微核率的影响，以及同种消毒剂下不同浓度对微核率的影响，得出相应的实验数据。

步骤：分为预试验与正式试验。预实验按照蚕豆的浸种与催芽，染毒，固定根尖细胞，染色，制片，镜检等步骤，了解并熟悉从蚕豆催芽到最后观察并统计微核的一系列步骤和消毒剂的浓度范围确定，以及确定达到根尖致死效应对应的染毒最高剂量，确定剂量-效应关系的敏感受试物浓度范围。

1、消毒剂的制备：本实验选用市场上常见的84消毒液（主要成分：次氯酸钠）、滴露牌消毒液（主要成分：对氯间二甲苯酚）、巴芙牌家居安全杀菌消毒剂（主要成分：聚六亚甲基胍）和新洁尔灭消毒液（主要成分：苯扎溴铵）为实验对象，各种消毒剂分别吸取0.2ml、0.4ml、0.8ml、1.2ml置于4个100ml容量瓶中，用蒸馏水定容并且振荡摇匀，制成浓度梯度为0.2%、0.4%、0.8%和1.2%的供试消毒剂，以蒸馏水作为阴性对照组（ck）。

2、蚕豆浸种、发根：取大小均匀、籽粒饱满的松滋青皮蚕豆若干粒，用水洗去表面杂质，然后用盛有蒸馏水的烧杯于25℃恒温浸泡，待浸泡了24h后，蚕豆吸水胀大，用培养皿、脱脂棉和白瓷盘于25℃恒温进行催芽生长48h，每24h换水2-3次，保持其湿度，待蚕豆根尖长至1-2厘米的时候就可进行处理。

4. 参考文献

[1] 邵爱华，叶亚新，陈豪，姚雪梅. 生活用品对蚕豆根尖细胞的诱变作用[j]. 安徽农业科学，2009,37（2）：560-562.

[2] 赵生友, 姜晓春, 王艳秋,等. 四种消毒剂的急性毒性试验和微核试验[j].癌变.畸变.突变, 2004, 16(3): 178-180.

[3] 崔莹. 不同清洁剂对蚕豆根尖微核诱导率的影响[j]. 陕西农业科学，2017,63（02）：31-32.

[4] 李莹，周细平，邓祥斌. 4种家用洗涤剂对蚕豆根尖细胞微核率的影响[j]. 贵州农业科学，2017,45（8）：19-22.

5. 计划与进度安排

1、2022年12月26日-2022年2月27日：确定论文选题，查阅相关文献，接受任务书。

2、2022年3月5日-2022年3月15日：与指导教师见面，撰写开题报告，设计实验方案，答辩ppt制作，准备开题答辩。

3、2022年3月18日-2022年3月24日：进行开题答辩并进行预实验（预实验包括蚕豆的浸种与催芽，染毒，固定根尖细胞，染色，制片，镜检等步骤）。

4、2022年4月1日-2022年4月2日：进行正式试验，根据预实验结果按照合适浓度梯度来稀释制备四种消毒剂，并且进行蚕豆的浸泡，浸泡时间为24h。