RSK2蛋白的表达与纯化开题报告

1. 研究目的与意义

癌症严重危害人类的健康，长期以来，虽然大量的抗肿瘤药物问世，但癌症的复发率、死亡率以及药物耐药性依然居高不下。近年来，随着靶向药物的问世，给广大癌症患者带来了新希望。但是，目前问世的靶向药物往往价格高昂，难以为广大人们群众所承受。因此，找寻开发高效的抗肿瘤活性成分成为研究热点和重点。仅以肺为例，我国每年大约新增患者27.9万例，位居肿瘤发病率首位，且存在较多的化疗耐药现象，特别是egfr-tki耐药更为广泛存在。因此，找寻新型抗肿瘤药物成为药学领域的研究热点和重点。

信号转导和转录激活子3（signaltransducersandactivatorsoftranscription3，stat3），在多种肿瘤细胞中存在着高表达、高活性，且与病理分离、预后、耐药等密切相关，参与调控细胞的增殖、周期、转化等过程。大量研究表明，熊果酸是存在于天然植物中的一种三萜类化合物，具有镇静、抗炎、抗菌、抗糖尿病、抗溃疡、降低血糖等多种生物学效应。不溶于水，乙醇中溶解,溶解后无异物.近年来发现它具有抗致癌、抗促癌、诱导f9畸胎瘤细胞分化和抗血管生成作用。研究发现：熊果酸能明显抑制hl－60细胞增殖，可诱导其凋亡；能使小鼠的巨噬细胞吞噬功能显著提高。体内试验证明，熊果酸可以明显增强机体免疫功能。说明它的抗肿瘤作用广泛，极有可能成为低毒有效的新型抗癌药物。熊果酸可能是stat3的潜在抑制剂，但其在egfr-tki耐药的肺癌细胞中的抑制效果和作用机制尚不清楚。因此，本论文采用westernblot、mtt、流式细胞术等技术和方法，以egfr-tki肺癌耐药细胞系nci-h1299、nci-h461等为对象，检测熊果酸以stat3为靶点调控肺癌耐药的效果和调控机制。

2. 研究内容和预期目标

本论文的主要研究内容如下：

1.mtt检测熊果酸对nci-h1299、nci-h461等细胞增殖的影响；

2.流式细胞术检测熊果酸对nci-h1299、nci-h461等细胞凋亡和细胞周期的影响；

3. 研究的方法与步骤

mtt检测熊果酸对nci-h1299、nci-h461等细胞增殖的影响；

流式细胞术检测熊果酸对nci-h1299、nci-h461等细胞凋亡和细胞周期的影响；

4. 参考文献

[1]孙可欣,郑荣寿,曾红梅,等.2014年中国肺癌发病和死亡分析.中华肿瘤杂志,2018,40(11):805-811.

[2]李庆伟,褚丹,王继红.stat3信号转导通路及肿瘤治疗的方法[j].沈阳师范大学学报:自然科学版,2009,27(2):230-235.

[3]林采余,卢从华,潘永红,等.水飞蓟宾增敏克唑替尼抑制间变性淋巴瘤激酶阳性非小细胞肺癌的作用及机制.中华肿瘤杂志,2017,39(9):650-656.

5. 计划与进度安排

2022-2022-1学期第17-20周-2022-2022-2学期第1-2周 查阅文献，完成开题报告的撰写。设计合成rnai载体；

第5-7周 检测熊果酸对nci-h1299、nci-h461等细胞增殖的影响；

第8-9周 检测熊果酸对nci-h1299、nci-h461等细胞凋亡和细胞周期的影响；