1. 研究目的与意义
辅酶q10(coenzymeq10,coq10)的化学名为2,3-二甲氧基-5-甲基-6-癸异戊烯基苯醌,广泛存在于动物、植物、微生物等细胞体内,是细胞呼吸链中的重要递氢体。最早由美国学者frederickcrane于1957年从牛心线粒体中分离得到。辅酶q10是包含了10个异戊二烯侧链的脂溶性醌类化合物,它广泛存在于包括人类在内的许多高等动物线粒体内膜中,是呼吸链组成中的必要成分。
这些年来,随着我国人口老龄化程度不断加深以及他汀类药物适用范围不断扩大,辅酶q10作为一种辅助药物,在治疗心脏衰竭方面,使用比例逐年增加。另外,辅酶q10具有清除氧自由基的功效,能延缓皮肤衰老,因此受到许多化妆品厂家的关注和青睐。医药和化妆品行业相关产品不断增长的需求,由微生物经济生产辅酶q10的途径也变得更加重要。我国目前每年辅酶q10消费量约为14t,价格为1,500,000$/t。但是辅酶q10目前在我国的产量很小,市场极不饱和。所以我国加快开发高产辅酶q10己成为当务之急。利用微生物发酵法生产辅酶q10,无论在产品的质量还是在安全性方面,都有较大的竞争优势。
类球红细菌是国内外常用的生产辅酶q10生产菌株,但目前国内对类球红细菌的研究还是较少。本研究探究其他碳氮源对产辅酶q10类球红细菌发酵影响,寻找高产辅酶q10类球红细菌发酵培养基最优优化。
2. 研究内容和预期目标
本论文研究主要内容如下:
本研究立足于国内外研究现状,在现代微生物育种技术、生物生化技术等多学科基础上,对类球红细菌进行培养基优化。具体内容如下:
1)活化保存的诱变后高产菌种,熟悉相关操作;
3. 研究的方法与步骤
研究方法:
通过摇床对锥形瓶中的辅酶q10类球红细菌进行培养;并考察不同碳、氮源对类球红细菌合成辅酶q10的影响;采用plackett-burman试验筛选影响辅酶q10类球红细菌发酵培养基的主要因素;采用hplc来测量菌体的产量;多次采用单因素试验来确定影响因子的量;利用响应面分析法对高产类球红细菌发酵生产辅酶q10的发酵培养基进行优化,得出最佳配方。
4. 参考文献
1张向阳,刘登如,堵国成,等.辅酶q10产生菌的抗性筛选及发酵条件优化[j].工业微生物,2007,37(3):5-9.
2戴冠苹,苗良田,孙涛,等.代谢工程改造大肠杆菌生产辅酶q10[j].生物工程学报,2015,31(2).
3wattgf,playfordda,croftnc,etal.conenzymeq1oimprovesendouthelialdysfunctionofthebranchialarteryintypeⅡdiabetesmellitus[j].diabetologia,2002,45(4):419-427
5. 计划与进度安排
1)2022-12-04~2022-01-11:接受任务、查阅和翻译文献、撰写及完成开题报告;
2)2022-01-12~2022-02-25:完成实验准备工作。斜面培养基制备与菌种的活化,同时在理论上熟悉试验流程:;
3)2022-02-26~2022-03-18:考察不同碳、氮源对类球红细菌合成辅酶q10的影响;
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