1. 研究目的与意义
背景:小麦是我国重要的粮食作物,但是近几年随着气候的变化,小麦产量安全问题日益突出。干旱常常是限制小麦生长和发育的主要环境胁迫因子。干旱对小麦的生理、生化都产生重要的影响,进而影响小麦的生长发育、产量和品质。
目的:以小麦幼苗为实验材料,采用等渗PEG-6000模拟干旱胁迫,研究干旱胁迫对幼苗逆境指标的影响。意义:从小麦的各项生理生化指标含量的变化,来研究干旱胁迫对小麦的影响,从而找到合适的方法来解决干旱胁迫问题,为解决小麦生产安全问题提供理论依据。
2. 研究内容和预期目标
研究内容:以小麦幼苗为实验材料,采用不同浓度的等渗PEG-6000模拟不同程度的干旱胁迫,测量相关逆境指标的含量以及变化,研究干旱胁迫对幼苗逆境指标的影响。
预期目标:准确测量各个测定指标,采用SPSS软件对实验结果进行t检验分析,客观评价干旱胁迫对小麦幼苗逆境指标的影响。
3. 研究的方法与步骤
测定指标
超氧化物歧化酶(sod)活性 氮蓝四唑(nbt)光还原法:依据超氧化物歧化酶抑制氮蓝四唑(nbt)在光下的还原作用来确定酶活性大小。在有氧化物质存在下,核黄素可被光还原,被还原的核黄素在有氧条件下极易再氧化而产生超氧阴离子自由基,超氧阴离子自由基可将氮蓝四唑还原为蓝色的甲腙,后者在560nm处有最大吸收。而sod可清除超氧阴离子自由基,从而抑制了甲腙的形成。于是光还原反应后,反应液蓝色愈深,说明酶活性愈低,反之酶活性愈高。据此可以计算出酶活性大小。丙二醛(mda)含量硫代巴比妥酸(tba)检测法:丙二醛(mda)是常用的膜脂过氧化指标,在酸性和高温度条件下,可以与硫代巴比妥酸(tba)反应生成红棕色的三甲川(3,5,5'—三甲基恶唑-2,4-二酮),其最大吸收波长在532nm。(添加一定量低浓度铁离子减少可溶性糖对测定的影响,通常植物组织中铁离子的含量为每克千重100—300ug,根据植物样品量和提取液的体积,通常fe3 的终浓度为0.5nmol/l)脯氨酸(pro)含量磺基水杨酸法:用磺基水杨酸提取植物样品时,脯氨酸便游离于磺基水杨酸的溶液中,然后用酸性茚三酮加热处理后,溶液即成红色,再用甲苯处理,则色素全部转移至甲苯中,色素的深浅即表示脯氨酸含量的高低。在520nm波长下比色,从标准曲线上查出(或用回归方程计算)脯氨酸的含量。 过氧化物酶(pod)活性愈创木酚法:在过氧化物酶(pod)催化下,h2o2将愈创木酚氧化成茶褐色产物。此产物在470nm处有最大吸收。
实验流程
4. 参考文献
[1] 王凯悦,陈芳泉,黄五星.植物干旱胁迫响应机制研究进展[j/ol].中国农业科技导报. https://doi.org/10.13304/j.nykjdb.2018.0115
[2] 蔡晓锋,胡体旭,叶杰,等.植物盐胁迫抗性的分子机制研究进展[j],华中农业大学学报.2015.34(3):134-141.
[3] 张自阳,王智煜,刘明久,等.干旱胁迫对不同年代小麦品种种子萌发特征的影响[j].河南农业科学.2018.47(3):23-28,33.
5. 计划与进度安排
2022-2022-1学期
1. 17周(2022-12-24) 接受任务;
2022-2022-2学期
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