1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
本课题的意义:
薤白,别名小根蒜、山蒜、苦蒜、小么蒜、小根菜、小根菜、大脑瓜儿、野蒜、野葱、野蕌,拉丁文名allium macrostemon bunge。属百合科、葱属植物。广泛分布于中国、日本和韩国等国的平原地区。多为食用,其根色白,也可作药用,为卫生部2002年公布的87种药食两用植物之一[1]。本实验将薤白多糖进行硫酸化修饰后,研究起在体外的抗氧化活性。
国内外研究概况:
2. 研究的基本内容和问题
研究的目标:
1、利用水溶醇沉法得薤白粗多糖并经 deae-纤维素柱层析得薤白多糖的其中一种级分;
2、利用氯磺酸-吡啶法对得到纯化后的薤白多糖进行硫酸化修饰;
3. 研究的方法与方案
技术路线:
样品制备 |
样品纯化 |
样品修饰 |
抗氧化活性测定 |
超氧阴离子自由基(O2-)的清除能力 |
羟自由基的清除能力 |
胡萝卜素/亚油酸体系 |
铁离子还原能力 |
DPPH的清除能力 |
实验方案:
一、粗糖的制备
薤白中提取多糖条件为:提取温度90℃、水料比12 mL/g、提取时间90 min及提取次数1次。
二、多糖纯化
经 DEAE-纤维素柱层析得薤白多糖的其中一种级分。
三、多糖硫酸化修饰
采用氯磺酸-吡啶法,改变氯磺酸-吡啶配比、反应温度和反应时间,观察修饰产物的硫酸基取代度( DS) 的变化。
四、DPPH的清除能力
利用DPPH 乙醇溶液在 517 nm 处有强烈的吸收,且自由基清除程度与褪色程度呈定量线性关系,用分光光度法比色定量分析,测定硫酸化薤白多糖的DPPH的清除能力。
五、超氧阴离子自由基(O2-)的清除能力
多糖与邻苯三酚(PR)溶液反应,并在 325 nm 处测定溶液的吸光度,测定硫酸化薤白多糖的超氧阴离子自由基(O2-)的清除能力。
六、羟自由基的清除能力
采用邻二氮菲-金属铁离子-H2O2体系测定硫酸化薤白多糖的羟自由基的清除能力
七、胡萝卜素/亚油酸体系
采用胡萝卜素/亚油酸体系测定多糖及修饰后多糖待测液的总抗氧化
能力。
八、铁离子还原能力
采用铁离子还原能力法(FRAP)测定多糖及修饰后多糖待测液的总抗氧化
能力。
可行性分析:
1、本课题的指导老师曾晓雄老师从事多糖相关工作,并发表多篇相关研究论文,并取得优异的研究成果。因此,该课题已有相关研究基础。
2、通过查阅大量与本项目有关的专业文献资料发现,该课题完全符合理论上的可行性。
4. 研究创新点
特色或创新之处
虽然夏新奎等人已做过薤白多糖的硫酸化修饰及其抗氧化活性的研究,但其抗氧化活性方面只做了O2-和OH两方面,评价指标不够全面,该课题将会更为系统、深入的研究体外抗氧化活性,这为本课题创性之处。
5. 研究计划与进展
研究进度 | 研究进展 |
2015年10月2016年4月 | 完成薤白多糖的提取及其纯化。 |
2016年4月2014年4月 | 完成薤白多糖的硫酸化修饰。 |
2016年4月2016年5月 | 完成修饰后薤白多糖的体外抗氧化活性的研究。 |
2016年5月2016年5月 | 数据统计,撰写论文,总结准备结题、验收。 |
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